Hva er en elektroforetisk mobilitetsskiftanalyse?

En analyse er en test designet for å skille en celles originale stykker i deler som er enkle å identifisere. Elektroforetisk mobilitetsskiftanalyse er et eksperiment som bruker elektrisitet til å bevege makromolekyler, som proteiner, gjennom en gelmatrise for å forårsake en separasjon mellom de forskjellige makromolekylene basert på størrelse. Som et bilbatteri er de negative og positive endene på motsatte sider av den elektroforetiske mobilitetsskiftanalysen, eller gelskiftanalyse. Dette får strøm til å tiltrekke seg makromolekylene basert på lading. Hvert makromolekyl beveger seg med en annen hastighet, da mindre opplever mindre forstyrrelse fra gelen.

Flere trinn er nødvendige for å sette opp en elektroforetisk mobilitetsskiftanalyse. Makromolekylene som må skilles, må utarbeides først. De fleste makromolekyler er oppnådd fra levende celler og krever spesifikke prosedyrer. Å skaffe delene som skal skilles, krever ofte en sentrifuge og en kjemisk reaksjon som bryter ned cellene. Sentrifugen vil spinne et hetteglass i høy hastighet og danne en pellet av de nødvendige makromolekylene. Dette blir oppløst, og ofte tilsettes en farge eller annen etikett for å spore gelskiftanalysen.

Gelen, noen ganger kalt sengen, må også være nylaget av en presis blanding av pulverisert agarose og vann som blir raskt fra væske til gel. Vanligvis vil en elektroforetisk mobilitetsskiftanalyse ha flere baner for separate analyser, som brukes til å sammenligne forskjellige makromolekylblandinger. Den ene banen er alltid satt som en kontroll og har vanligvis bare en slags makromolekyl.

Strømkilden bør velges nøye og ikke kobles til før alt er klart. Hvor lang tid strømmen er på, bestemmer mobilitetsskiftet til makromolekylene. Det er viktig å skille brikkene nok for riktig analyse. Hvis strømmen ikke er riktig tidsbestemt, vil fremtidige sammenligninger også være unøyaktige. Retningen til makromolekylene bestemmes av hvilken ladning de har naturlig - de fleste beveger seg mot den negative enden.

Enkle genetiske tester og proteinanalyser blir ofte utført med en elektroforetisk mobilitetsskiftanalyse. Dette vises ved forskjellige skift i forskjellige baner. Hvis en interaksjon oppstår, kombineres og løper makromolekylene langsommere gjennom matrisen sammenlignet med kontrollfeltet med bare ett makromolekyl. Gelskiftanalyser brukes til å raskt eliminere eller bekrefte genetiske resultater som kompliserte metoder kan ta lenger tid å fullføre. De kan også bestemme om antistoffer, et immunsystemmakromolekyl, holder seg til proteiner som kan brukes til å bekjempe bakterier og virus.