Hvad er et elektroforetisk mobilitetsskiftassay?

Et assay er en test designet til at adskille en celler originale stykker i dele, der er lette at identificere.Elektroforetisk mobilitetsskiftassay er et eksperiment, der bruger elektricitet til at flytte makromolekyler, som proteiner, gennem en gelmatrix til at forårsage en adskillelse mellem de forskellige makromolekyler baseret på størrelse.Som et bilbatteri er de negative og positive ender på modsatte sider af det elektroforetiske mobilitetsskiftassay eller gelskiftassay.Dette får elektricitet til at tiltrække makromolekylerne baseret på ladning.Hvert makromolekyle bevæger sig i en anden hastighed, da mindre oplever mindre interferens fra gelen.

Flere trin er påkrævet for at indstille et elektroforetisk mobilitetsskiftassay.De makromolekyler, der skal adskilles, skal først fremstilles.De fleste makromolekyler opnås fra levende celler og kræver specifikke procedurer.At få de dele, der skal adskilles, kræver ofte en centrifuge og en kemisk reaktion, der nedbryder cellerne.Centrifugen spin et hætteglas i høj hastighed og danner en pellet af de nødvendige makromolekyler.Dette opløses, og ofte tilsættes en farve eller et andet etiket for at hjælpe med at spore gelskiftassayet.

Gelen, sommetider kaldes sengen, skal også være frisklavet af en præcis blanding af pulveriseret agarose og vand, der hurtigt drejer fra væske til gel.Almindeligvis vil et elektroforetisk mobilitetsskiftassay have flere baner til separate assays, der bruges til at sammenligne forskellige makromolekyleblandinger.En bane er altid indstillet som en kontrol og har normalt kun en slags makromolekyle.

Strømkilden skal vælges omhyggeligt og er ikke tilsluttet, før alt er klar.Mængden af tid, som strømmen er på, bestemmer mobilitetsskiftet af makromolekylerne.Det er vigtigt at adskille brikkerne nok til korrekt analyse.Hvis strømmen ikke er korrekt tidsbestemt, vil fremtidige sammenligninger også være unøjagtige.Retningen af makromolekylerne bestemmes af, hvilken ladning de besidder naturligt mdash;De fleste bevæger sig mod den negative ende.

Enkle genetiske tests og proteinanalyser udføres ofte med et elektroforetisk mobilitetsskiftassay.Dette vises af forskellige skift i forskellige baner.Hvis der opstår en interaktion, kombineres og løber makromolekylerne langsommere gennem matrixen sammenlignet med kontrolbanen med kun et makromolekyle.Gelskiftassays bruges til hurtigt at eliminere eller bekræfte genetiske resultater, som komplicerede metoder kan tage længere tid at gennemføre.De kan også bestemme, om antistoffer, et immunsystem makromolekyle, holder sig til proteiner, der kan bruges til at bekæmpe bakterier og vira.