Qu'est-ce qu'un dosage de décalage de mobilité électrophorétique?
Un test est un test conçu pour séparer les pièces originales d'une cellule en parties faciles à identifier. Le test de décalage de mobilité électrophorétique est une expérience qui utilise l’électricité pour déplacer des macromolécules, comme des protéines, à travers une matrice de gel afin de séparer les différentes macromolécules en fonction de leur taille. Comme une batterie de voiture, les extrémités négative et positive se trouvent sur les côtés opposés du dosage de décalage de mobilité électrophorétique, ou dosage de décalage sur gel. Cela entraîne l'électricité à attirer les macromolécules en fonction de la charge. Chaque macromolécule se déplace à un rythme différent, les plus petites subissent moins d'interférences du gel.
Plusieurs étapes sont nécessaires pour configurer un test électrophorétique à décalage de mobilité. Les macromolécules à séparer doivent être préalablement préparées. La plupart des macromolécules sont obtenues à partir de cellules vivantes et nécessitent des procédures spécifiques. L'obtention des pièces à séparer nécessite souvent une centrifugeuse et une réaction chimique qui décompose les cellules. La centrifugeuse centrifugera un flacon à grande vitesse et formera un culot des macromolécules nécessaires. Ceci est dissous et souvent une couleur ou une autre étiquette est ajoutée pour aider à suivre le test de décalage sur gel.
Le gel, parfois appelé le lit, doit également être fraîchement préparé à partir d’un mélange précis d’agarose en poudre et d’eau qui passe rapidement du liquide au gel. Généralement, un test électrophorétique à décalage de mobilité aura plusieurs lignes pour des tests séparés, qui sont utilisés pour comparer différents mélanges de macromolécules. Une piste est toujours définie comme contrôle et ne contient généralement qu'un seul type de macromolécule.
La source d'alimentation doit être sélectionnée avec soin et n'est pas connectée tant que tout n'est pas prêt. La durée pendant laquelle l’alimentation est sous tension détermine le changement de mobilité des macromolécules. Il est important de séparer suffisamment les pièces pour pouvoir les analyser correctement. Si l'alimentation n'est pas correctement chronométrée, les comparaisons futures seront également inexactes. La direction des macromolécules sera déterminée par la charge qu'elles possèdent naturellement - la plupart se dirigent vers l'extrémité négative.
Des tests génétiques simples et des analyses de protéines sont couramment effectués avec un dosage électrophorétique à décalage de mobilité. Ceci est affiché par différents décalages dans différentes voies. Si une interaction se produit, les macromolécules se combinent et courent plus lentement dans la matrice par rapport à la piste de contrôle avec une seule macromolécule. Les tests de décalage sur gel sont utilisés pour éliminer ou confirmer rapidement les résultats génétiques selon lesquels des méthodes compliquées pourraient prendre plus de temps. Ils peuvent également déterminer si des anticorps, une macromolécule du système immunitaire, adhèrent à des protéines pouvant être utilisées pour lutter contre les bactéries et les virus.