Co je detekce protilátek?
Detekce protilátek je v medicíně důležitá pro detekci onemocnění, protože protilátky jsou velké proteiny, které mohou detekovat viry a bakterie. Detekce protilátek se provádí v laboratořích a v terénu, aby se prozkoumaly vazby protilátek a antigenů a identifikovala se protilátka podle své konkrétní změny barvy, když je na ni navázána molekula substrátu reagující s enzymem, zatímco je stále vázána na antigen. Detekční test je znám jako enzymatický imunosorbentový test (ELISA). Před vývojem ELISA byly jedinými testy radioimunoanalýzy, které identifikovaly protilátky podle jejich specifické radioaktivity v 60. letech 20. století. Počátkem 70. let došlo k vývoji několika technik ELISA k identifikaci specifických protilátek.
Technika nepřímé sendvičové ELISA detekce protilátek připravuje pufrovaný roztok obsahující antigen nemoci a váže jej na plastovou desku. Poté je zavedena primární protilátka od pacienta, která se váže s antigenem. Poté se zavede sekundární protilátka s připojeným enzymem a přidá se substrát pro enzym. To způsobuje reakci, která mění barvu enzymu a signalizuje, že se dvě protilátky navázaly, pokud je protilátka od pacienta pozitivní na tento chorobný antigen. Síla změny barvy označuje množství nemoci, kterou protilátka detekovala; tato síla barvy se pak kvantitativně měří spektrometrem.
Další technikou ELISA, která je dobrá, když jsou vzorky od pacientů surové nebo nečisté, je kompetitivní ELISA, když je neznačená protilátka inkubována se vzorkem antigenu pacienta. Navázaný komplex protilátka / antigen se promyje tak, že se nenavázaná protilátka odstraní a zavede se sekundární protilátka spojená s enzymem specifickým pro primární protilátku, aby se navázala na antigen. S přídavkem substrátu k enzymu, pokud je nemoc detekována protilátkou, bude enzym produkovat chromogenní nebo fluorescenční vlastnosti jako signál. Polní test používaný izraelskými lékaři používá zkumavku plnou bílkovinných fragmentů a protilátek a zavedení modré kapaliny. Pokud modrá kapalina během 10 minut zčervená, protilátka rozpoznává konkrétní antigen ve zkumavce.
V těžko dostupných oblastech rozvojových zemí nejsou laboratoře snadno dostupné. Mnoho lékařských souprav pro detekci protilátek bylo prodáno zdravotnickým pracovníkům za účelem testování na tuberkulózu, zejména tuberkulózu dětského a lidského imunodeficience / syndrom autoimunního deficitu (HIV / AIDS). Jedna studie zahrnující 68 specifických studií zjistila, že tyto soupravy nebyly tak spolehlivé jako mikroskopie sputa.
Malárie je další onemocnění, u kterého detekce protilátek používá fluorescenční testovací postup protilátky. Tento postup je vhodný pro screening dárců krve, protože malárie indukovaná transfuzí se nemusí při jednoduchém vyšetření krevního filmu projevit. Pokud pacient vykazuje opakované krevně negativní vzorky a přesto vykazuje silnou symptomologii onemocnění, může jej fluorescenční marker odhalit. Při zkoumání pod mikroskopem protilátky proti malárii často vykazují jablko-zelenou barvu, která je pozitivní na parazita malárie.