Was ist Antikörpernachweis?
Der Antikörpernachweis ist in der Medizin wichtig, um Krankheiten nachzuweisen, da Antikörper große Proteine sind, die Viren und Bakterien nachweisen können. Der Antikörpernachweis wird in Laboratorien und auf dem Gebiet durchgeführt, um Antikörper- und Antigenbindungen zu untersuchen und einen Antikörper anhand seiner besonderen Farbänderung zu identifizieren, wenn ein enzymreaktives Substratmolekül daran gebunden ist, während es noch an das Antigen gebunden ist. Der Detektionstest ist als ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay) bekannt. Vor der Entwicklung des ELISA waren die einzigen Tests Radioimmunoassays, die in den 1960er Jahren Antikörper anhand ihrer spezifischen Radioaktivität identifizierten. In den frühen 1970er Jahren wurden verschiedene ELISA-Techniken zur Identifizierung spezifischer Antikörper entwickelt.
Die indirekte Sandwich-ELISA-Technik zum Nachweis von Antikörpern stellt eine gepufferte Lösung her, die ein Krankheitsantigen enthält, und bindet sie an eine Kunststoffplatte. Dann wird ein primärer Antikörper von einem Patienten eingeführt, um an das Antigen zu binden. Als nächstes wird ein sekundärer Antikörper mit einem gebundenen Enzym eingeführt und ein Substrat für das Enzym wird hinzugefügt. Dies führt zu einer Reaktion, die die Farbe des Enzyms ändert und signalisiert, dass sich die beiden Antikörper gebunden haben, wenn der Antikörper des Patienten für dieses Krankheitsantigen positiv ist. Die Stärke der Farbänderung gibt die Menge an Krankheiten an, die der Antikörper festgestellt hat. Diese Farbstärke wird dann mit einem Spektrometer quantitativ gemessen.
Eine andere ELISA-Technik, die gut ist, wenn Proben von Patienten roh oder unrein sind, ist der kompetitive ELISA, wenn ein nicht markierter Antikörper mit der Patientenantigenprobe inkubiert wird. Der gebundene Antikörper / Antigen-Komplex wird gewaschen, so dass der ungebundene Antikörper entfernt wird und ein sekundärer Antikörper, der mit einem für den primären Antikörper spezifischen Enzym gekoppelt ist, eingeführt wird, um an das Antigen zu binden. Bei Zugabe eines Substrats zum Enzym erzeugt das Enzym, wenn die Krankheit durch den Antikörper nachgewiesen wird, chromogene oder fluoreszierende Eigenschaften als Signal. Ein von israelischen Ärzten durchgeführter Feldtest verwendet ein Reagenzglas mit Proteinfragmenten und Antikörpern sowie die Einführung einer blauen Flüssigkeit. Wenn die blaue Flüssigkeit innerhalb von zehn Minuten rot wird, wird das bestimmte Antigen im Reagenzglas vom Antikörper für diese bestimmte Krankheit erkannt.
In schwer erreichbaren Gebieten von Entwicklungsländern sind Laboratorien nicht leicht zugänglich. Viele im Handel erhältliche Antikörpernachweis-Kits wurden für Angehörige der Gesundheitsberufe verkauft, um auf Tuberkulose zu testen, insbesondere auf Tuberkulose im Zusammenhang mit dem Virus / Autoimmunmangelsyndrom (HIV / AIDS) bei Kindern und beim Menschen. Eine Studie mit 68 spezifischen Studien ergab, dass diese Kits nicht so zuverlässig waren wie die Sputumabstrichmikroskopie.
Malaria ist eine weitere Krankheit, für die der Antikörpernachweis ein Fluoreszenzantikörpertestverfahren verwendet. Dieses Verfahren eignet sich für das Screening von Blutspendern, da eine transfusionsbedingte Malaria bei einer einfachen Blutbilduntersuchung möglicherweise nicht auftritt. Wenn ein Patient wiederholt blutnegative Proben zeigt, die jedoch starke Symptome der Krankheit aufweisen, kann der Fluoreszenzmarkertest dies aufdecken. Die Antikörper gegen Malaria zeigen unter dem Mikroskop häufig eine apfelgrüne Farbe, die für den Malariaparasiten positiv ist.