O que é detecção de anticorpos?
A detecção de anticorpos é importante na medicina para detectar doenças, pois os anticorpos são proteínas grandes que podem detectar vírus e bactérias. A detecção de anticorpos é realizada em laboratórios e em campo para examinar as ligações de anticorpos e antígenos e identificar um anticorpo por sua mudança de cor específica quando uma molécula de substrato que reage à enzima está ligada a ele enquanto ainda está ligada ao antígeno. O teste de detecção é conhecido como ensaio imunossorvente ligado a enzima (ELISA). Antes do desenvolvimento do ELISA, os únicos ensaios eram radioimunoensaios que identificaram anticorpos por sua radioatividade específica na década de 1960. O início dos anos 70 assistiu ao desenvolvimento de várias técnicas de ELISA para identificar anticorpos específicos.
A técnica de ELISA de sanduíche indireto de detecção de anticorpos prepara uma solução tamponada contendo um antígeno da doença e a liga a uma placa plástica. Então, um anticorpo primário de um paciente é introduzido para se ligar ao antígeno. Em seguida, um anticorpo secundário com uma enzima conectada é introduzido e um substrato para a enzima é adicionado. Isso causa uma reação que altera a cor da enzima, sinalizando a ligação dos dois anticorpos, se o anticorpo do paciente for positivo para o antígeno da doença. A força da mudança de cor denota a quantidade de doença que o anticorpo detectou; essa força da cor é então medida quantitativamente por um espectrômetro.
Outra técnica ELISA boa quando as amostras dos pacientes são brutas ou impuras é o ELISA Competitivo, quando um anticorpo não marcado é incubado com a amostra de antígeno do paciente. O complexo anticorpo / antígeno ligado é lavado para que o anticorpo não ligado seja removido e um anticorpo secundário acoplado a uma enzima específica para o anticorpo primário seja introduzido para se ligar ao antígeno. Com a adição de um substrato à enzima, se a doença for detectada pelo anticorpo, a enzima produzirá propriedades cromogênicas ou fluorescentes como sinal. Um teste de campo usado pelos médicos israelenses usa um tubo de ensaio cheio de fragmentos de proteínas e anticorpos e a introdução de um líquido azul. Se o líquido azul ficar vermelho em dez minutos, o antígeno específico no tubo de teste é reconhecido pelo anticorpo para aquela doença específica.
Em áreas de difícil acesso dos países em desenvolvimento, os laboratórios não são facilmente acessíveis. Muitos kits comerciais de detecção de anticorpos foram vendidos para profissionais de saúde para testar tuberculose, particularmente tuberculose pediátrica e vírus da imunodeficiência humana / síndrome da deficiência auto-imune (HIV / AIDS). Um estudo compreendendo 68 estudos específicos constatou que esses kits não eram tão confiáveis quanto a microscopia de escarro.
A malária é outra doença para a qual a detecção de anticorpos utiliza um procedimento de teste de anticorpos fluorescentes. Esse procedimento é bom para a triagem de doadores de sangue, pois a malária induzida por transfusão pode não aparecer em um simples exame de filme sanguíneo. Se um paciente estiver mostrando repetidas amostras negativas do sangue, mas exibindo forte sintomatologia da doença, o teste do marcador fluorescente pode revelá-lo. Quando examinados ao microscópio, os anticorpos para a malária geralmente mostram uma cor verde-maçã que é positiva para o parasita da malária.