Che cos'è il rilevamento di anticorpi?
Il rilevamento di anticorpi è importante in medicina per rilevare le malattie, poiché gli anticorpi sono grandi proteine in grado di rilevare virus e batteri. Il rilevamento di anticorpi viene effettuato in laboratorio e sul campo per esaminare i legami di anticorpi e antigeni e identificare un anticorpo mediante il suo particolare cambiamento di colore quando una molecola di substrato che reagisce agli enzimi è collegata ad esso mentre è ancora legata all'antigene. Il test di rilevazione è noto come test di immunoassorbimento enzimatico (ELISA). Prima dello sviluppo di ELISA, gli unici saggi erano saggi radioimmunologici che identificavano gli anticorpi dalla loro specifica radioattività negli anni '60. I primi anni '70 videro lo sviluppo di diverse tecniche ELISA per identificare anticorpi specifici.
La tecnica ELISA a sandwich indiretto di rilevazione di anticorpi prepara una soluzione tamponata contenente un antigene della malattia e la lega a una piastra di plastica. Quindi, viene introdotto un anticorpo primario di un paziente per legarsi con l'antigene. Successivamente, viene introdotto un anticorpo secondario con un enzima attaccato e viene aggiunto un substrato per l'enzima. Ciò provoca una reazione che cambia il colore dell'enzima, segnalando che i due anticorpi si sono uniti, se l'anticorpo del paziente è positivo per quell'antigene della malattia. L'intensità del cambiamento di colore indica la quantità di malattia rilevata dall'anticorpo; questa intensità di colore viene quindi misurata quantitativamente da uno spettrometro.
Un'altra tecnica ELISA valida quando i campioni di pazienti sono grezzi o impuri è l'ELISA competitivo, quando un anticorpo senza etichetta viene incubato con il campione di antigene del paziente. Il complesso anticorpo / antigene legato viene lavato in modo tale da rimuovere l'anticorpo non legato e viene introdotto un anticorpo secondario accoppiato con un enzima specifico all'anticorpo primario per legarsi con l'antigene. Con l'aggiunta di un substrato all'enzima, se la malattia viene rilevata dall'anticorpo, l'enzima produrrà proprietà cromogene o fluorescenti come segnale. Un test sul campo utilizzato dai medici israeliani utilizza una provetta piena di frammenti di proteine e anticorpi e l'introduzione di un liquido blu. Se il liquido blu diventa rosso entro dieci minuti, il particolare antigene nella provetta viene riconosciuto dall'anticorpo per quella particolare malattia.
Nelle aree difficili da raggiungere dei paesi in via di sviluppo, i laboratori non sono facilmente accessibili. Molti kit di rilevazione di anticorpi commerciali sono stati venduti agli operatori sanitari per testare la tubercolosi, in particolare la tubercolosi associata a virus dell'immunodeficienza pediatrica e umana / sindrome da deficit autoimmune (HIV / AIDS). Uno studio comprendente 68 studi specifici ha scoperto che questi kit non erano affidabili come la microscopia a striscio di espettorato.
La malaria è un'altra malattia per la quale il rilevamento di anticorpi utilizza una procedura di test di anticorpi fluorescenti. Questa procedura è buona per lo screening dei donatori di sangue poiché la malaria indotta da trasfusioni potrebbe non manifestarsi con un semplice esame del film ematico. Se un paziente mostra ripetuti campioni negativi al sangue, ma presenta una forte sintomatologia della malattia, il test del marker fluorescente può rivelarlo. Quando esaminati al microscopio, gli anticorpi per la malaria mostrano spesso un colore verde mela che è positivo per il parassita della malaria.