Cos'è il rilevamento degli anticorpi?
Il rilevamento degli anticorpi è importante in medicina per rilevare la malattia, poiché gli anticorpi sono grandi proteine che possono rilevare virus e batteri. Il rilevamento degli anticorpi viene effettuato nei laboratori e sul campo per esaminare i legami anticorpi e antigene e identificare un anticorpo per il suo particolare cambiamento di colore quando una molecola di substrato che reava reacente è collegata ad esso mentre è ancora legata all'antigene. Il test di rilevamento è noto come dosaggio immunosorbente legato all'enzima (ELISA). Prima dello sviluppo di ELISA, gli unici test erano i test radioimmunoti che identificavano gli anticorpi dalla loro specifica radioattività negli anni '60. I primi anni '70 hanno visto lo sviluppo di diverse tecniche ELISA per identificare anticorpi specifici.
La tecnica ELISA sandwich indiretta del rilevamento degli anticorpi prepara una soluzione tamponata contenente un antigene della malattia e la lega a una piastra di plastica. Quindi, viene introdotto un anticorpo primario di un paziente per legarsi all'antigene. Successivamente, un anticorpo secondario con un enzima attaccatoviene introdotto e viene aggiunto un substrato per l'enzima. Ciò provoca una reazione che cambia il colore dell'enzima, segnalando che i due anticorpi hanno legato se l'anticorpo del paziente è positivo per quell'antigene della malattia. La forza del cambiamento di colore indica la quantità di malattia che l'anticorpo ha rilevato; Questa forza di colore viene quindi misurata quantitativamente da uno spettrometro.
Un'altra tecnica ELISA è buona quando i campioni di pazienti sono grezzi o impuri è l'ELISA competitivo, quando un anticorpo senza etichetta viene incubata con il campione di antigene del paziente. Il complesso anticorpo/antigene legato viene lavato in modo da rimuovere l'anticorpo illimitato e viene introdotto un anticorpo secondario accoppiato con un enzima specifico per l'anticorpo primario per legarsi all'antigene. Con l'aggiunta di un substrato all'enzima, se la malattia viene rilevata dall'anticorpo, l'enzima produrrà P cromogenico o fluorescentecorde come segnale. Un test sul campo utilizzato dai medici israeliani utilizza un tubo di prova pieno di frammenti e anticorpi proteici e l'introduzione di un liquido blu. Se il liquido blu diventa rosso entro dieci minuti, l'antigene particolare nel tubo di prova è riconosciuto dall'anticorpo per quella particolare malattia.
Nelle aree difficili da raggiungere dei paesi in via di sviluppo, i laboratori non sono facilmente accessibili. Molti kit di rilevamento degli anticorpi commerciali sono stati venduti per gli operatori sanitari per testare la tubercolosi, in particolare la tubercolosi correlata al virus dell'immunodeficienza pediatrica e dell'immunodeficienza umana. Uno studio che comprende 68 studi specifici ha scoperto che questi kit non erano così affidabili come la microscopia allo striscio di espettorato.
La malaria è un'altra malattia per la quale il rilevamento degli anticorpi utilizza una procedura di test anticorpale fluorescente. Questa procedura è utile per lo screening dei donatori di sangue in quanto la malaria indotta da trasfusioni potrebbe non mostrare un semplice esame del cinema. Se un pazientesta mostrando ripetuti campioni di sangue negativo, ma esibendo una forte sintomologia della malattia, il test di marcatore fluorescente può rivelarlo. Se esaminati al microscopio, gli anticorpi per la malaria mostrano spesso un colore verde mela positivo per il parassita della malaria.