Was ist ein Gramm Fleck?
Ein Gram-Fleck bezieht sich auf ein positives oder negatives Testergebnis, das erzeugt wird, wenn eine Jodwäsche in eine Bakterienkultur eingebracht wird, um deren Spezies zu identifizieren. Bei diesem als Gram-Färbung bekannten Test wird das Vorhandensein von Lipopolysacchariden (Lipoglykanen) und Peptidoglykanen (Mureinen) in den Zellwänden der Bakterienprobe nachgewiesen. Bakterien mit einem hohen Gehalt an Peptidoglykanen sollen grampositiv sein. Im Gegensatz dazu weisen geringere Mengen an Peptidoglykanen mit Lipopolysacchariden darauf hin, dass die Probe gramnegativ ist.
Zunächst wird die Bakterienprobe auf einen Objektträger gelegt und nur so weit erhitzt, dass sie unschädlich für den Behandler ist. Anschließend wird die Bakterienprobe für bis zu 60 Sekunden mit einer Enzianviolett-Jod-Lösung behandelt. Der Objektträger wird dann vorsichtig unter klarem Wasser abgespült und die Gram-Lösung wird aufgetragen, eine Mischung aus Jod und Kaliumjodid, verdünnt in Wasser. Dieser Schritt löst eine Reaktion auf die Enzianviolettverbindung aus.
Die Reaktion erzeugt zunächst eine dunkelblaue Farbe. Eine anschließende Spülung mit Ethylalkohol führt jedoch dazu, dass die Farbe in einigen Bakterienproben ausblutet, in anderen jedoch nicht. Eine endgültige Farbstofflösung wird aufgetragen, die eine Kontrastfarbe verwendet, normalerweise eine Variation von Rot. Eine Probe, die diese Gegenfärbung akzeptiert, wird rosa angezeigt und als gramnegativ bezeichnet. Eine Probe, die die dunkelblaue Farbe beibehält, ist jedoch grampositiv.
Abgesehen von Identifizierungszwecken liegt die Bedeutung des Gram-Färbetests in der Tatsache, dass gramnegative Bakterien potente Endotoxine produzieren, die schwere Krankheiten wie Cholera und Typhus verursachen können. Viele gramnegative Bakterien sind auch resistent gegen Antibiotika und es ist nicht möglich, daraus Impfstoffe herzustellen. Darüber hinaus führen nicht alle Bakterien zu einem positiven oder negativen Ergebnis. Tatsächlich werden einige Arten als gramunbestimmt oder gramvariabel angesehen. Andere Arten sind von dem Test völlig unberührt, weil sie eine wachsartige Schutzschicht in ihren Zellwänden haben, durch die die Flecken nicht eindringen können.
Der Gram-Fleckentest wurde Ende des 19. Jahrhunderts vom bekannten dänischen Bakteriologen Hans Christian Gram entwickelt. Der ursprüngliche Zweck des Gram-Färbetests bestand jedoch darin, überhaupt nicht zwischen verschiedenen Bakterienspezies zu unterscheiden. Tatsächlich machte sich Dr. Gram lediglich daran, eine bessere Methode zum Nachweis von Bakterien in Auswurfproben von Lungenentzündungspatienten zu entwickeln. Es ist auch interessant festzustellen, dass Dr. Grams Entdeckung, obwohl unbeabsichtigt, einen großen Einfluss auf die Erforschung antibiotikaresistenter Bakterien ein halbes Jahrhundert später haben würde.