O que é uma mancha de Gram?

Uma coloração de Gram refere-se a um resultado positivo ou negativo do teste produzido quando uma lavagem com iodo é introduzida em uma cultura de bactérias para identificar sua espécie. Esse teste, conhecido como coloração de Gram, funciona detectando a presença de lipopolissacarídeos (lipoglicanos) e peptidoglicanos (mureinas) contidos nas paredes celulares da amostra de bactérias. As bactérias que têm um alto nível de peptidoglicanos são consideradas Gram-positivas. Por outro lado, níveis mais baixos de peptidoglicanos com lipopolissacarídeos indicam que a amostra é Gram-negativa.

Primeiro, a amostra de bactérias é colocada em uma lâmina de vidro e aquecida apenas a ponto de torná-la inócua em termos de ser infecciosa para o manipulador. Em seguida, a amostra de bactérias é tratada com uma solução de iodo violeta-genciana por até sessenta segundos. A lâmina é então lavada suavemente em água limpa e a solução Gram é aplicada, que é uma mistura de iodo e iodeto de potássio diluído em água. Este passo desencadeia uma reação ao composto violeta de genciana.

Inicialmente, a reação produz uma cor azul escura. No entanto, um enxágüe subsequente com álcool etílico faz com que a cor em algumas amostras de bactérias escoe, mas não em outras. É aplicada uma solução final de corante que usa uma cor contrastante, geralmente uma variação do vermelho. Uma amostra que aceita essa contracoloração aparecerá em rosa e é designada como Gram-negativa. No entanto, uma amostra que mantém a cor azul escura é Gram-positiva.

Além dos propósitos de identificação, o significado do teste de coloração de Gram reside no fato de as bactérias Gram-negativas produzirem endotoxinas potentes que podem causar doenças graves, como cólera e febre tifóide. Muitas bactérias Gram-negativas também são resistentes aos antibióticos e não é possível fabricar vacinas a partir delas. Além disso, nem todas as bactérias produzem um resultado positivo ou negativo. De fato, algumas espécies são consideradas Gram indeterminadas ou variáveis ​​Gram. Outras espécies não são totalmente afetadas pelo teste simplesmente devido a uma camada protetora semelhante à cera em suas paredes celulares, que as manchas não podem permear.

O teste de coloração de Gram foi desenvolvido no final do século XIX pelo notável bacteriologista dinamarquês Hans Christian Gram. No entanto, o objetivo original do teste de coloração de Gram não era distinguir as diferentes espécies bacterianas. De fato, o Dr. Gram apenas se propôs a descobrir uma maneira melhor de detectar a presença de bactérias em amostras de escarro fornecidas por pacientes com pneumonia. Também é interessante notar que a descoberta do Dr. Gram, embora não intencional, teria um grande impacto no estudo de bactérias resistentes a antibióticos meio século depois.