Co to jest plama Grama?

Barwienie metodą Grama odnosi się do pozytywnego lub negatywnego wyniku testu uzyskanego, gdy do hodowli bakterii wprowadza się popłuczyny jodowe w celu zidentyfikowania jego gatunku. Ten test, znany jako barwienie metodą Grama, polega na wykrywaniu obecności lipopolisacharydów (lipoglikanów) i peptydoglikanów (murein) zawartych w ścianach komórkowych próbki bakterii. Bakterie, które mają wysoki poziom peptydoglikanów, są uważane za Gram-dodatnie. Natomiast niższe poziomy peptydoglikanów z lipopolisacharydami wskazują, że próbka jest Gram-ujemna.

Najpierw próbkę bakterii umieszcza się na szklanym szkiełku i ogrzewa tylko do tego stopnia, że ​​staje się nieszkodliwa z punktu widzenia zakaźności dla przewodnika. Następnie próbkę bakterii traktuje się roztworem jodu fioletowo-goryczkowego przez maksymalnie sześćdziesiąt sekund. Następnie szkiełko delikatnie płukano pod czystą wodą i nakładano roztwór Grama, który jest mieszaniną jodu i jodku potasu rozcieńczonego w wodzie. Ten krok wywołuje reakcję na związek fioletu goryczki.

Początkowo reakcja daje ciemnoniebieski kolor. Jednak kolejne płukanie alkoholem etylowym prowadzi do zabarwienia w niektórych próbkach bakterii do wypuszczenia, ale w innych nie. Stosowany jest końcowy roztwór barwnika, który wykorzystuje kontrastowy kolor, zwykle odmianę czerwieni. Próbka, która zaakceptuje tę barwnik kontrastowy, będzie różowa i będzie oznaczona jako Gram-ujemna. Jednak próbka, która zachowuje ciemnoniebieski kolor, jest Gram-dodatnia.

Oprócz celów identyfikacji znaczenie testu barwienia Grama polega na tym, że bakterie Gram-ujemne wytwarzają silne endotoksyny, które mogą powodować poważne choroby, takie jak cholera i dur brzuszny. Wiele bakterii Gram-ujemnych jest również odpornych na antybiotyki i nie można z nich wytwarzać szczepionek. Ponadto nie wszystkie bakterie dają wynik dodatni lub ujemny. W rzeczywistości niektóre gatunki uważa się za nieokreślone w gramach lub zmienne w gramach. Badanie nie ma wpływu na inne gatunki po prostu z powodu posiadania w ścianach komórkowych woskowatej warstwy ochronnej, której plamy nie mogą przeniknąć.

Test barwienia metodą Grama został opracowany pod koniec XIX wieku przez znanego duńskiego bakteriologa, Hansa Christiana Grama. Jednak pierwotnym celem testu barwienia Grama nie było w ogóle rozróżnienie różnych gatunków bakterii. W rzeczywistości dr Gram postanowił jedynie opracować lepszy sposób wykrywania obecności bakterii w próbkach plwociny dostarczonych przez pacjentów z zapaleniem płuc. Warto również zauważyć, że odkrycie dr Gram, choć niezamierzone, miałoby duży wpływ na badanie bakterii opornych na antybiotyki pół wieku później.