Hva er en Gram Stain?

En Gram-flekk refererer til et positivt eller negativt testresultat produsert når en jodvask introduseres til en kultur av bakterier for å identifisere arten. Denne testen, kjent som Gram-farging, fungerer ved å påvise tilstedeværelsen av lipopolysakkarider (lipoglykaner) og peptidoglykaner (mureiner) som er inneholdt i celleveggene til bakterieprøven. Bakterier som har et høyt nivå av peptidoglykaner sies å være Gram-positive. I kontrast indikerer lavere nivåer av peptidoglykaner med lipopolysakkarider at prøven er gramnegativ.

Først blir bakterieprøven plassert på en glassglide og varmes bare opp til det punktet at den blir uskyldig når det gjelder smittefarlig behandling. Deretter behandles bakterieprøven med en gentian fiolett-jodoppløsning i opptil seksti sekunder. Deretter skylles lysbildet forsiktig under rent vann og Gram-løsningen påføres, som er en blanding av jod og kaliumjodid fortynnet i vann. Dette trinnet utløser en reaksjon på den gentianfiolette forbindelsen.

Opprinnelig gir reaksjonen en mørk blå farge. Imidlertid fører en påfølgende skylling med etylalkohol til at fargen i noen bakterieprøver blør ut, men ikke i andre. En endelig fargestoffløsning blir brukt som bruker en kontrastfarge, vanligvis en variant av rødt. En prøve som godtar dette utseendet vil virke rosa og betegnes som Gram-negativ. Imidlertid er en prøve som beholder den mørkeblå fargen Gram-positiv.

Bortsett fra identifikasjonsformål, ligger betydningen av Gram-fargetesten i det faktum at Gram-negative bakterier produserer potente endotoksiner som kan forårsake alvorlige sykdommer, som kolera og tyfus. Mange gramnegative bakterier er også resistente mot antibiotika, og det er ikke mulig å produsere vaksiner fra dem. I tillegg gir ikke alle bakterier et positivt eller negativt resultat. Noen arter er faktisk ansett som Gram ubestemmelig eller Gram-variabel. Andre arter påvirkes ikke av testen ganske enkelt på grunn av at de har et vokslignende beskyttelseslag i celleveggene som flekkene ikke kan gjennomsyre.

Gram-flekketesten ble utviklet på slutten av 1800-tallet av den anerkjente danske bakteriologen Hans Christian Gram. Imidlertid var det opprinnelige formålet med Gram-fargetesten ikke å skille mellom forskjellige bakteriearter i det hele tatt. Faktisk har Dr. Gram bare forsøkt å utvikle en bedre måte å oppdage tilstedeværelsen av bakterier i sputumprøver levert av pasienter med lungebetennelse. Det er også interessant å merke seg at Dr. Grams funn, selv om det var utilsiktet, ville ha stor innvirkning på studiet av antibiotikaresistente bakterier et halvt århundre senere.