Hvad er en Gram Stain?
En gramfarvning henviser til et positivt eller negativt testresultat, der produceres, når en jodvask introduceres til en bakteriekultur for at identificere dens arter. Denne test, kendt som Gram-farvning, fungerer ved at detektere tilstedeværelsen af lipopolysaccharider (lipoglycaner) og peptidoglycaner (mureiner) indeholdt i cellevæggene i bakterieprøven. Bakterier, der har et højt niveau af peptidoglycaner, siges at være Gram-positive. I modsætning hertil indikerer lavere niveauer af peptidoglycaner med lipopolysaccharider, at prøven er gramnegativ.
Først anbringes bakterieprøven på et glasglas og opvarmes kun til det punkt, at den gør uskadelig i form af at være infektiøs for håndtereren. Dernæst behandles bakterieprøven med en gentian violet-jodopløsning i op til seksti sekunder. Derefter skylles objektglasset forsigtigt under rent vand, og Gram-opløsningen påføres, som er en blanding af iod og kaliumiodid fortyndet i vand. Dette trin udløser en reaktion på den gentianviolette forbindelse.
Oprindeligt frembringer reaktionen en mørkeblå farve. En efterfølgende skylning med ethylalkohol fører imidlertid til, at farven i nogle bakterieprøver bløder ud, men ikke i andre. En endelig farvestofopløsning anvendes, der bruger en kontrastfarve, normalt en variation af rød. En prøve, der accepterer dette forsænk, ser lyserød ud og betegnes som Gram-negativ. Imidlertid er en prøve, der bevarer den mørkeblå farve, Gram-positiv.
Bortset fra identifikationsformål ligger betydningen af Gram-farvetesten i det faktum, at Gram-negative bakterier producerer potente endotoksiner, der kan forårsage alvorlige sygdomme, såsom kolera og tyfus. Mange gramnegative bakterier er også resistente over for antibiotika, og det er ikke muligt at fremstille vacciner fra dem. Derudover giver ikke alle bakterier et positivt eller negativt resultat. Faktisk betragtes nogle arter som Gram ubestemmelig eller Gram-variabel. Andre arter påvirkes ikke af testen ganske enkelt på grund af at have et vokslignende beskyttelseslag i deres cellevægge, som pletterne ikke kan trænge igennem.
Gram-farvetesten blev udviklet i slutningen af 1800-tallet af den bemærkede danske bakteriolog, Hans Christian Gram. Imidlertid var det oprindelige formål med Gram-farvetesten ikke at skelne mellem forskellige bakteriearter overhovedet. Faktisk begyndte Dr. Gram blot at udtænke en bedre måde at påvise tilstedeværelsen af bakterier i sputumprøver fra patienter med lungebetændelse. Det er også interessant at bemærke, at Dr. Grams opdagelse, selv om det var utilsigtet, ville have en stor indflydelse på undersøgelsen af antibiotikaresistente bakterier et halvt århundrede senere.