¿Qué es una mancha de gram?
Una mancha de gram se refiere a un resultado de prueba positivo o negativo producido cuando se introduce un lavado de yodo a un cultivo de bacterias para identificar su especie. Esta prueba, conocida como tinción de Gram, funciona al detectar la presencia de lipopolisacáridos (lipoglucanos) y peptidoglucanos (mureins) contenidos dentro de las paredes celulares de la muestra de bacterias. Se dice que las bacterias que tienen un alto nivel de peptidoglucanos son gram-positivos. Por el contrario, los niveles más bajos de peptidoglucanos con lipopolisacáridos indican que la muestra es gramnegativa.
Primero, la muestra de bacterias se coloca en un portaobjetos de vidrio y se calienta solo hasta el punto de hacer que lo inocente en términos de ser infecciosos con el controlador. A continuación, la muestra de bacterias se trata con una solución de diodo de violeta gentiana por hasta sesenta segundos. El portaobjetos se enjuague suavemente bajo agua limpia y se aplica la solución de gramo, que es una mezcla de yodo y yoduro de potasio diluido en agua. Este paso desencadena una reacción al gentianoCompuesto violeta.
Inicialmente, la reacción produce un color azul oscuro. Sin embargo, un enjuague posterior con alcohol etílico conduce al color en algunas muestras de bacterias para sangrar, pero no en otras. Se aplica una solución de tinte final que utiliza un color contrastante, generalmente una variación de rojo. Una muestra que acepta esta contratinta aparecerá rosa, y se designa como gramnegativo. Sin embargo, una muestra que conserva el color azul oscuro es gram-positivo.
Además de los propósitos de identificación, la importancia de la prueba de tinción Gram radica en el hecho de que las bacterias gramnegativas producen potentes endotoxinas que pueden causar enfermedades graves, como el cólera y la tifoidea. Muchas bacterias gramnegativas también son resistentes a los antibióticos y no es posible fabricar vacunas de ellas. Además, no todas las bacterias producen un resultado positivo o negativo. De hecho, algunas especies se consideran gram indeterminaVariable TE o Gram. Otras especies no se ven afectadas por la prueba simplemente debido a que tienen una capa protectora similar a cera en sus paredes celulares que las manchas no pueden impregnar.
La prueba de mancha de gram fue desarrollada a fines del siglo XIX por el conocido bacteriólogo danés, Hans Christian Gram. Sin embargo, el propósito original de la prueba de tinción Gram no era distinguir entre diferentes especies bacterianas. De hecho, el Dr. Gram simplemente se propuso idear una mejor manera de detectar la presencia de bacterias en muestras de esputo proporcionadas por pacientes con neumonía. También es interesante observar que el descubrimiento del Dr. Gram, aunque no intencional, tendría un gran impacto en el estudio de las bacterias resistentes a los antibióticos medio siglo después.