¿Qué es un ELISA en suero?
El ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas en suero (ELISA en suero) es un método utilizado para determinar la cantidad de una sustancia biológica en una muestra de suero basándose en la interacción específica entre un antígeno y un anticuerpo. Los ejemplos de sustancias biológicas de interés incluyen un anticuerpo producido en respuesta a una infección viral, como un anticuerpo contra el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH), o una hormona que indica el embarazo, como la gonadotropina coriónica humana (hCG), o un autoinmune anticuerpo producido en la artritis reumatoide, como el factor reumatoide. En general, hay un ensayo directo, que usa un anticuerpo específico para detectar la presencia de antígeno en una muestra de suero, y un ensayo indirecto, que usa un antígeno para determinar la presencia de anticuerpos en una muestra de suero.
En el ELISA directo en suero, una muestra que contiene una cantidad desconocida de antígeno se une a una superficie inmóvil, como un tubo de reacción o una placa de microtitulación, y se incuba con un anticuerpo específico que está químicamente unido a una enzima. Por el contrario, en el ELISA indirecto en suero, se une un antígeno conocido a una superficie inmóvil y luego se incuba con la muestra de suero que contiene una cantidad desconocida de anticuerpo. Se espera que el anticuerpo específico de antígeno en la muestra de suero se una fuertemente al antígeno inmovilizado, mientras que los anticuerpos no específicos se eliminan en los siguientes pasos de lavado. Generalmente, la superficie inmóvil se trata con un segundo anticuerpo que reconoce la región invariable de todos los anticuerpos y que está químicamente unida a una enzima. Tanto en el ELISA directo como en el indirecto, el paso final consiste en la adición de un sustrato específico de enzima, iniciando una reacción que produce una señal medible que es directamente proporcional a la cantidad de antígeno o anticuerpo presente en la muestra de suero.
El ELISA en suero es una prueba ampliamente utilizada por varias razones. Lo que es más importante, se considera una prueba clínica confiable debido a la especificidad de la interacción antígeno-anticuerpo, y la sensibilidad de este ensayo permite la detección de sustancias biológicas en concentraciones extremadamente bajas en suero. Está diseñado para la evaluación de una gran cantidad de muestras al mismo tiempo y, por lo tanto, a menudo se usa en operaciones a gran escala, como el examen de muestras de donantes de sangre para detectar la presencia de anticuerpos contra el VIH. Además, los kits ELISA que miden los anticuerpos y antígenos comúnmente analizados están disponibles comercialmente para su uso en entornos clínicos o de investigación, y contienen convenientemente todos los reactivos necesarios para llevar a cabo un experimento completo.
Un área de estudio en crecimiento involucra la aplicación de la tecnología ELISA en suero en el área de detección de citoquinas. Las citocinas son moléculas de proteínas solubles secretadas por el sistema inmune que a menudo están involucradas en procesos inflamatorios; Por lo tanto, los niveles de citoquinas son informativos con respecto a los estados de enfermedad asociados con la inflamación crónica, como enfermedades cardíacas, enfermedades autoinmunes y enfermedades digestivas. Se cree que la evaluación de los niveles de citocinas puede distinguir entre enfermedades inflamatorias del intestino, como la enfermedad de Crohn y la colitis ulcerosa, y eventualmente puede predecir el resultado en enfermedades cardíacas y artritis reumatoide.