Cos'è un siero ELISA?
Il test immunosorbente sierico legato agli enzimi (sierica ELISA) è un metodo usato per determinare la quantità di una sostanza biologica in un campione sierico basandosi sull'interazione specifica tra un antigene e un anticorpo. Esempi di sostanze biologiche di interesse includono un anticorpo prodotto in risposta a un'infezione virale, come un anticorpo contro il virus dell'immunodeficienza umana (HIV) o a un ormone che indica una gravidanza, come la gonadotropina corionica come la reumatoide. In generale, esiste un test diretto, che utilizza un anticorpo specifico per rilevare la presenza di antigene in un campione sierico e un test indiretto, che utilizza un antigene per determinare la presenza di anticorpi in un campione sierico.
Nel siero diretto ELISA, un campione contenente una quantità sconosciuta di antigene è attaccato a una superficie immobile, come un tubo di reazione o una piastra di microtitro ed è incubato con un anticorpo specifico che è chimicamente collegato a un enzima. Al contrario, nel siero indiretto ELISA, un antigene noto è attaccato a una superficie immobile e quindi è incubata con il campione sierico che contiene una quantità sconosciuta di anticorpo. L'anticorpo specifico dell'antigene nel campione sierico dovrebbe legarsi strettamente all'antigene immobilizzato, mentre gli anticorpi non specifici vengono rimossi nelle seguenti fasi di lavaggio. In generale, la superficie immobile viene trattata con un secondo anticorpo che riconosce la regione invariabile di tutti gli anticorpi e che è chimicamente collegata a un enzima. In ELISA sia diretta che indiretta, il passaggio finale consiste nell'aggiunta di un substrato specifico per enzimi, che avvia una reazione che produce un segnale misurabile che è direttamente proporzionale alla quantità di antigene o anticorpo presente nel campione sierico.
Il siero ELISA è un test ampiamente usato per diversi motivi. Soprattutto,È considerato un test clinico affidabile a causa della specificità dell'interazione antigene-anticorpo e la sensibilità di questo dosaggio consente il rilevamento di sostanze biologiche a concentrazioni estremamente basse nel siero. È progettato per la valutazione di un gran numero di campioni contemporaneamente, e quindi viene spesso utilizzato in operazioni su larga scala, come lo screening dei campioni di donatori di sangue per la presenza di anticorpi HIV. Inoltre, i kit ELISA che misurano comunemente anticorpi e antigeni sono disponibili in commercio per l'uso in contesti clinici o di ricerca e contengono comodamente tutti i reagenti necessari per lo svolgimento di un esperimento completo.
Un'area di studio in crescita prevede l'applicazione della tecnologia sierica ELISA nell'area del rilevamento delle citochine. Le citochine sono molecole proteiche solubili secrete dal sistema immunitario che sono spesso coinvolte nei processi infiammatori; I livelli di citochine sono quindi informativi riguardo agli stati patologici associati a infiamma cronicozione, come malattie cardiache, malattie autoimmuni e malattie digestive. Si pensa che la valutazione dei livelli di citochine possa essere in grado di distinguere tra malattie intestinali infiammatorie, come la malattia di Crohn e la colite ulcerosa, e che alla fine possa essere in grado di prevedere il risultato nelle malattie cardiache e nell'artrite reumatoide.