Hvad er et serum ELISA?

Serumenzymbundet immunosorbentassay (serum ELISA) er en metode, der anvendes til at bestemme mængden af ​​et biologisk stof i en serumprøve ved at stole på den specifikke interaktion mellem et antigen og et antistof. Eksempler på biologiske stoffer af interesse inkluderer et antistof produceret som respons på en virusinfektion, såsom et antistof mod human immundefektvirus (HIV), eller mod et hormon, der indikerer graviditet, såsom human chorionisk gonadotropin (hCG) eller mod en autoimmun antistof produceret ved reumatoid arthritis, såsom rheumatoid faktor. Generelt er der et direkte assay, der bruger et specifikt antistof til at detektere tilstedeværelsen af ​​antigen i en serumprøve, og et indirekte assay, der bruger et antigen til at bestemme tilstedeværelsen af ​​antistoffer i en serumprøve.

I det direkte serum ELISA er en prøve indeholdende en ukendt mængde antigen bundet til en immobil overflade, såsom et reaktionsrør eller en mikrotiterplade, og inkuberes med et specifikt antistof, der er kemisk bundet til et enzym. Omvendt er et kendt antigen i det indirekte serum ELISA bundet til en immobil overflade og derefter inkuberet med serumprøven, der indeholder en ukendt mængde antistof. Det antigenspecifikke antistof i serumprøven forventes at binde tæt til det immobiliserede antigen, medens ikke-specifikke antistoffer fjernes i de følgende vasketrin. Generelt behandles den immobile overflade med et andet antistof, der genkender den uoverensstemmende region af alle antistoffer, og som er kemisk bundet til et enzym. I både den direkte og indirekte ELISA består det sidste trin af tilsætning af et enzymspecifikt substrat, idet der indledes en reaktion, der frembringer et målbart signal, der er direkte proportional med mængden af ​​antigen eller antistof til stede i serumprøven.

Serum ELISA er en bredt anvendt test af flere grunde. Det vigtigste er, at det betragtes som en pålidelig klinisk test på grund af specificiteten af ​​antigen-antistofinteraktion, og følsomheden af ​​dette assay tillader påvisning af biologiske stoffer i ekstremt lave koncentrationer i serum. Det er designet til vurdering af et stort antal prøver på samme tid, og det bruges ofte i storskala operationer, såsom screening af bloddonorprøver for tilstedeværelse af HIV-antistoffer. Derudover er ELISA-sæt, der måler almindeligt analyserede antistoffer og antigener, kommercielt tilgængelige til anvendelse i kliniske eller forskningsindstillinger og indeholder bekvemt alle nødvendige reagenser til udførelse af et komplet eksperiment.

Et voksende studieområde involverer anvendelse af serum ELISA-teknologi inden for detektion af cytokin. Cytokiner er opløselige proteinmolekyler secerneret af immunsystemet, som ofte er involveret i inflammatoriske processer; cytokinniveauer er derfor informative med hensyn til sygdomstilstande, der er forbundet med kronisk inflammation, såsom hjertesygdom, autoimmune sygdomme og fordøjelsessygdomme. Det menes, at vurdering af cytokinniveauer muligvis kan skelne mellem inflammatoriske tarmsygdomme, såsom Crohns sygdom og ulcerøs colitis, og til sidst kan være i stand til at forudsige udfaldet i hjertesygdomme og leddegigt.