Hvad er et serum Elisa?
Serumenzymbundet immunosorbentassay (serum ELISA) er en metode, der anvendes til at bestemme mængden af et biologisk stof i en serumprøve ved at stole på den specifikke interaktion mellem et antigen og et antistof. Eksempler på biologiske stoffer af interesse inkluderer et antistof produceret som respons på en virusinfektion, såsom et antistof mod human immundefektvirus (HIV) eller til et hormon, der indikerer graviditet, såsom human chorionisk gonadotropin (HCG) eller til et autoimmunt antistof produceret i rheumatoid arthritis, såsom Rheumatoid Factor. Generelt er der et direkte assay, der bruger et specifikt antistof til at detektere tilstedeværelsen af antigen i en serumprøve og et indirekte assay, der bruger et antigen til at bestemme tilstedeværelsen af antistoffer i en serumprøve.
I den direkte serum ELISA er en prøve, der indeholder en ukendt mængde antigen, fastgjort til en immobil overflade, såsom et reaktionsrør eller en mikrotiterplade, og inkuberes med et specifikt antistof, der er kemisk forbundet med et enzym. Omvendt i det indirekte serum ELISA er et kendt antigen fastgjort til en immobile overflade og inkuberes derefter med serumprøven, der indeholder en ukendt mængde antistof. Det antigenspecifikke antistof i serumprøven forventes at binde tæt til det immobiliserede antigen, mens ikke-specifikke antistoffer fjernes i de følgende vasketrin. Generelt behandles den immobile overflade med et andet antistof, der genkender den uovertrufne region for alle antistoffer, og som er kemisk knyttet til et enzym. I både det direkte og indirekte ELISA består det sidste trin af tilsætning af et enzymspecifikt underlag, der initierer en reaktion, der producerer et målbart signal, der er direkte proportional med mængden af antigen eller antistof, der er til stede i serumprøven.
Serum ELISA er en meget anvendt test af flere grunde. Vigtigst af alt,Det betragtes som en pålidelig klinisk test på grund af specificiteten af antigen-antistofinteraktionen, og følsomheden af dette assay tillader påvisning af biologiske stoffer ved ekstremt lave koncentrationer i serum. Det er designet til vurdering af et stort antal prøver på samme tid, og det bruges ofte i store operationer, såsom screening af bloddonorprøver for tilstedeværelsen af HIV-antistoffer. Derudover er ELISA -sæt, der måler almindeligt analyserede antistoffer og antigener, kommercielt tilgængelige til brug i kliniske eller forskningsindstillinger og indeholder bekvemt alle nødvendige reagenser til udførelse af et komplet eksperiment.
Et voksende studieområde involverer anvendelse af serum ELISA -teknologi inden for cytokindetektion. Cytokiner er opløselige proteinmolekyler, der udskilles af det immunsystem, der ofte er involveret i inflammatoriske processer; Cytokinniveauer er derfor informative om sygdomstilstande forbundet med kronisk inflammmation, såsom hjertesygdom, autoimmune sygdomme og fordøjelsessygdomme. Det menes, at vurdering af cytokinniveauer muligvis kan skelne mellem inflammatoriske tarmsygdomme, såsom Crohns sygdom og ulcerøs colitis, og kan til sidst være i stand til at forudsige resultatet i hjertesygdomme og reumatoid arthritis.