O que é um ELISA sérico?
O ensaio imunossorvente ligado a enzima sérica (ELISA sérico) é um método usado para determinar a quantidade de uma substância biológica em uma amostra de soro, baseando-se na interação específica entre um antígeno e um anticorpo. Exemplos de substâncias biológicas de interesse incluem um anticorpo produzido em resposta a uma infecção viral, como um anticorpo contra o vírus da imunodeficiência humana (HIV), ou a um hormônio que indica gravidez, como a gonadotrofina coriônica humana (hCG) ou a um autoimune anticorpo produzido na artrite reumatóide, como fator reumatóide. Em geral, existe um ensaio direto, que usa um anticorpo específico para detectar a presença de antígeno em uma amostra de soro, e um ensaio indireto, que usa um antígeno para determinar a presença de anticorpos em uma amostra de soro.
No ELISA sérico direto, uma amostra contendo uma quantidade desconhecida de antígeno é anexada a uma superfície imóvel, como um tubo de reação ou uma placa de microtitulação, e é incubada com um anticorpo específico, quimicamente ligado a uma enzima. Por outro lado, no ELISA sérico indireto, um antígeno conhecido é anexado a uma superfície imóvel e depois é incubado com a amostra de soro que contém uma quantidade desconhecida de anticorpo. Espera-se que o anticorpo específico do antígeno na amostra de soro se ligue firmemente ao antígeno imobilizado, enquanto os anticorpos não específicos são removidos nas etapas de lavagem a seguir. Geralmente, a superfície imóvel é tratada com um segundo anticorpo que reconhece a região invariável de todos os anticorpos e que é quimicamente ligado a uma enzima. Tanto no ELISA direto quanto no indireto, a etapa final consiste na adição de um substrato específico da enzima, iniciando uma reação que produz um sinal mensurável diretamente proporcional à quantidade de antígeno ou anticorpo presente na amostra de soro.
O ELISA sérico é um teste amplamente utilizado por várias razões. Mais importante ainda, é considerado um teste clínico confiável devido à especificidade da interação antígeno-anticorpo, e a sensibilidade desse ensaio permite a detecção de substâncias biológicas em concentrações séricas extremamente baixas. Ele é projetado para a avaliação de um grande número de amostras ao mesmo tempo e, portanto, é frequentemente usado em operações em larga escala, como a triagem de amostras de doadores de sangue quanto à presença de anticorpos anti-HIV. Além disso, kits ELISA que medem anticorpos e antígenos comumente testados estão disponíveis comercialmente para uso em ambientes clínicos ou de pesquisa e contêm convenientemente todos os reagentes necessários para a realização de uma experiência completa.
Uma área crescente de estudo envolve a aplicação da tecnologia ELISA sérica na área de detecção de citocinas. As citocinas são moléculas de proteína solúveis secretadas pelo sistema imunológico que frequentemente estão envolvidas em processos inflamatórios; os níveis de citocinas são, portanto, informativos sobre os estados de doença associados à inflamação crônica, como doenças cardíacas, doenças autoimunes e doenças digestivas. Pensa-se que a avaliação dos níveis de citocinas possa distinguir entre doenças inflamatórias intestinais, como a doença de Crohn e a colite ulcerativa, e possa eventualmente prever resultados em doenças cardíacas e artrite reumatóide.