O que é uma ELISA sérica?
O ensaio imunossorvente ligado à enzima sérica (ELISA sérica) é um método usado para determinar a quantidade de uma substância biológica em uma amostra sérica, contando com a interação específica entre um antígeno e um anticorpo. Exemplos de substâncias biológicas de interesse incluem um anticorpo produzido em resposta a uma infecção viral, como um anticorpo contra o vírus da imunodeficiência humana (HIV), ou a um hormônio que indica gravidez, como a gonatotropina coriada humana. Em geral, existe um ensaio direto, que usa um anticorpo específico para detectar a presença de antígeno em uma amostra de soro e um ensaio indireto, que usa um antígeno para determinar a presença de anticorpos em uma amostra de soro.
Na ELISA sérica direta, uma amostra contendo uma quantidade desconhecida de antígeno é anexada a uma superfície imóvel, como um tubo de reação ou uma placa de microtitular e é incubado com um anticorpo específico que está quimicamente ligado a uma enzima. Por outro lado, na ELISA sérica indireta, um antígeno conhecido é ligado a uma superfície imóvel e, em seguida, é incubado com a amostra sérica que contém uma quantidade desconhecida de anticorpo. Espera-se que o anticorpo específico do antígeno na amostra sérica se ligue firmemente ao antígeno imobilizado, enquanto os anticorpos não específicos são removidos nas etapas de lavagem a seguir. Geralmente, a superfície imóvel é tratada com um segundo anticorpo que reconhece a região invariável de todos os anticorpos e que está quimicamente ligada a uma enzima. Tanto na ELISA direta quanto indireta, a etapa final consiste na adição de um substrato específico da enzima, iniciando uma reação que produz um sinal mensurável que é diretamente proporcional à quantidade de antígeno ou anticorpo presente na amostra sérica.
O ELISA sérico é um teste amplamente utilizado por vários motivos. O mais importante,É considerado um teste clínico confiável devido à especificidade da interação antígeno-anticorpo, e a sensibilidade desse ensaio permite a detecção de substâncias biológicas em concentrações extremamente baixas no soro. Ele foi projetado para a avaliação de um grande número de amostras ao mesmo tempo e, portanto, é frequentemente usado em operações em larga escala, como a triagem de amostras de doadores de sangue para a presença de anticorpos HIV. Além disso, os kits ELISA que medem anticorpos e antígenos comumente analisados estão disponíveis comercialmente para uso em ambientes clínicos ou de pesquisa e contêm convenientemente todos os reagentes necessários para realizar um experimento completo.
Uma área de estudo em crescimento envolve a aplicação da tecnologia sérica ELISA na área de detecção de citocinas. As citocinas são moléculas de proteína solúvel secretadas pelo sistema imunológico que geralmente estão envolvidas em processos inflamatórios; Os níveis de citocinas são, portanto, informativos em relação aos estados de doenças associados ao inflamma crônicoção, como doenças cardíacas, doenças autoimunes e doenças digestivas. Pensa -se que a avaliação dos níveis de citocinas possa ser capaz de distinguir entre doenças inflamatórias intestinais, como a doença de Crohn e a colite ulcerosa, e pode eventualmente ser capaz de prever o resultado em doenças cardíacas e artrite reumatóide.