Qu'est-ce qu'un sérum ELISA?
Le test d'immunosorbant lié à une enzyme sérique (ELISA sérique) est une méthode utilisée pour déterminer la quantité d'une substance biologique dans un échantillon de sérum en s'appuyant sur l'interaction spécifique entre un antigène et un anticorps. Des exemples de substances biologiques d'intérêt incluent un anticorps produit en réponse à une infection virale, tel qu'un anticorps contre le virus de l'immunodéficience humaine (VIH), ou une hormone indiquant une grossesse, telle que la gonadotrophine chorionique humaine (hCG), ou à une protéine auto-immune anticorps produit dans la polyarthrite rhumatoïde, tel que le facteur rhumatoïde. En général, il existe un test direct, qui utilise un anticorps spécifique pour détecter la présence d'antigène dans un échantillon de sérum, et un test indirect, qui utilise un antigène pour déterminer la présence d'anticorps dans un échantillon de sérum.
Dans le test de sérum direct, un échantillon contenant une quantité inconnue d'antigène est fixé à une surface immobile, telle qu'un tube de réaction ou une plaque de microtitration, et est incubé avec un anticorps spécifique lié chimiquement à une enzyme. Inversement, dans l’ELISA indirect de sérum, un antigène connu est fixé à une surface immobile, puis est incubé avec l’échantillon de sérum contenant une quantité inconnue d’anticorps. L'anticorps spécifique de l'antigène dans l'échantillon de sérum devrait se lier étroitement à l'antigène immobilisé, tandis que les anticorps non spécifiques sont éliminés lors des étapes de lavage suivantes. Généralement, la surface immobile est traitée avec un second anticorps qui reconnaît la région invariable de tous les anticorps et qui est chimiquement lié à une enzyme. Dans les tests ELISA direct et indirect, la dernière étape consiste à ajouter un substrat spécifique à une enzyme, ce qui déclenche une réaction qui produit un signal mesurable directement proportionnel à la quantité d'antigène ou d'anticorps présent dans l'échantillon de sérum.
Le sérum ELISA est un test largement utilisé pour plusieurs raisons. Plus important encore, il est considéré comme un test clinique fiable en raison de la spécificité de l'interaction antigène-anticorps, et la sensibilité de ce test permet la détection de substances biologiques à des concentrations sériques extrêmement basses. Conçu pour l’évaluation simultanée d’un grand nombre d’échantillons, il est souvent utilisé dans les opérations de grande envergure, telles que la recherche d’anticorps anti-VIH dans les échantillons de donneurs de sang. En outre, les kits ELISA qui mesurent les antigènes et les anticorps couramment testés sont disponibles dans le commerce pour une utilisation en clinique ou en recherche et contiennent de manière pratique tous les réactifs nécessaires à la réalisation d'une expérience complète.
Un domaine d’étude en pleine croissance concerne l’application de la technologie ELISA du sérum dans le domaine de la détection des cytokines. Les cytokines sont des molécules de protéines solubles sécrétées par le système immunitaire souvent impliquées dans les processus inflammatoires; Les niveaux de cytokines sont donc informatifs sur les états pathologiques associés à une inflammation chronique, tels que les maladies cardiaques, les maladies auto-immunes et les maladies digestives. On estime que l'évaluation des niveaux de cytokines pourrait permettre de distinguer les maladies inflammatoires de l'intestin, telles que la maladie de Crohn et la colite ulcéreuse, et éventuellement de prédire l'évolution de la maladie cardiaque et de la polyarthrite rhumatoïde.