Vad är en serum ELISA?
Serumenzymbunden immunosorbentanalys (serum ELISA) är en metod som används för att bestämma mängden av ett biologiskt substans i ett serumprov genom att förlita sig på den specifika interaktionen mellan ett antigen och en antikropp. Exempel på biologiska ämnen av intresse inkluderar en antikropp som produceras som svar på en virusinfektion, såsom en antikropp mot humant immunbristvirus (HIV), eller på ett hormon som indikerar graviditet, såsom human chorionisk gonadotropin (HCG), eller till ett autoimmuant antikropp som produceras i rheumatoid, såsom rheoid. I allmänhet finns det en direkt analys, som använder en specifik antikropp för att detektera närvaron av antigen i ett serumprov, och en indirekt analys, som använder ett antigen för att bestämma närvaron av antikroppar i ett serumprov.
I det direkta serumet ELISA är ett prov som innehåller en okänd mängd antigen fäst vid en orörlig yta, såsom ett reaktionsrör eller en mikrotiterplatta och inkuberas med en specifik antikropp som är kemiskt kopplad till ett enzym. Omvänt, i det indirekta serumet ELISA, är ett känt antigen fäst vid en orörlig yta och inkuberas sedan med serumprovet som innehåller en okänd mängd antikropp. Den antigenspecifika antikroppen i serumprovet förväntas binda hårt till det immobiliserade antigenet, medan icke-specifika antikroppar avlägsnas i följande tvättsteg. I allmänhet behandlas den orörliga ytan med en andra antikropp som känner igen det oöverträffande området för alla antikroppar och som är kemiskt kopplad till ett enzym. I både det direkta och indirekta ELISA består det sista steget av tillsats av ett enzymspecifikt substrat, som initierar en reaktion som ger en mätbar signal som är direkt proportionell mot mängden antigen eller antikropp närvarande i serumprovet.
Serum ELISA är ett allmänt använt test av flera skäl. Viktigast,Det betraktas som ett pålitligt kliniskt test på grund av specificiteten för antigen-antikroppsinteraktionen, och känsligheten för denna analys möjliggör detektering av biologiska ämnen vid extremt låga koncentrationer i serum. Den är utformad för bedömning av ett stort antal prover samtidigt, och används ofta i storskaliga operationer, såsom screening av blodgivarprover för närvaro av HIV-antikroppar. Dessutom är ELISA -satser som mäter vanligtvis analyserade antikroppar och antigener kommersiellt tillgängliga för användning i kliniska eller forskningsinställningar och innehåller bekvämt alla nödvändiga reagens för att genomföra ett fullständigt experiment.
Ett växande studieområde involverar tillämpning av serum ELISA -teknik inom området för cytokindetektering. Cytokiner är lösliga proteinmolekyler som utsöndras av immunsystemet som ofta är involverade i inflammatoriska processer; Cytokinnivåer är därför informativa när det gäller sjukdomstillstånd förknippade med kronisk inflammation, såsom hjärtsjukdomar, autoimmuna sjukdomar och matsmältningssjukdomar. Man tror att bedömningen av cytokinnivåer kan kunna skilja mellan inflammatoriska tarmsjukdomar, såsom Crohns sjukdom och ulcerös kolit, och så småningom kan kunna förutsäga resultat vid hjärtsjukdomar och reumatoid artrit.