Vad är ett serum ELISA?

Den serumenzymbundna immunosorbentanalysen (serum ELISA) är en metod som används för att bestämma mängden av en biologisk substans i ett serumprov genom att förlita sig på den specifika interaktionen mellan ett antigen och en antikropp. Exempel på biologiska substanser av intresse inkluderar en antikropp producerad som svar på en virusinfektion, såsom en antikropp mot humant immunbristvirus (HIV), eller mot ett hormon som indikerar graviditet, såsom humant korionisk gonadotropin (hCG) eller mot en autoimmun antikropp producerad vid reumatoid artrit, såsom reumatoid faktor. I allmänhet finns det en direkt analys, som använder en specifik antikropp för att detektera närvaron av antigen i ett serumprov, och en indirekt analys, som använder ett antigen för att bestämma närvaron av antikroppar i ett serumprov.

I direkt serum ELISA är ett prov som innehåller en okänd mängd antigen fäst vid en orörlig yta, såsom ett reaktionsrör eller en mikrotiterplatta, och inkuberas med en specifik antikropp som är kemiskt kopplad till ett enzym. Omvänt, i det indirekta serum ELISA, är ett känt antigen fäst vid en orörlig yta och inkuberas sedan med serumprovet som innehåller en okänd mängd antikropp. Den antigenspecifika antikroppen i serumprovet förväntas binda tätt till det immobiliserade antigenet, medan icke-specifika antikroppar avlägsnas i följande tvättsteg. I allmänhet behandlas den orörliga ytan med en andra antikropp som känner igen den oväxlande regionen hos alla antikroppar, och som är kemiskt kopplad till ett enzym. I både direkt och indirekt ELISA består det slutliga steget av tillsats av ett enzymspecifikt substrat, initierande av en reaktion som ger en mätbar signal som är direkt proportionell mot mängden antigen eller antikropp som finns i serumprovet.

Serum ELISA är ett allmänt använt test av flera skäl. Det viktigaste är att det anses vara ett tillförlitligt kliniskt test på grund av specificiteten av antigen-antikroppinteraktion, och känsligheten för denna analys möjliggör detektion av biologiska substanser vid extremt låga koncentrationer i serum. Det är utformat för bedömning av ett stort antal prover samtidigt, och används därför ofta i storskaliga operationer, såsom screening av blodgivarprover för närvaro av HIV-antikroppar. Dessutom är ELISA-satser som mäter vanligt analyserade antikroppar och antigener kommersiellt tillgängliga för användning i kliniska eller forskningsinställningar och innehåller bekvämt alla nödvändiga reagens för att utföra ett fullständigt experiment.

Ett växande studieområde involverar tillämpningen av serum ELISA-teknik inom området för detektering av cytokin. Cytokiner är lösliga proteinmolekyler utsöndrade av immunsystemet som ofta är involverade i inflammatoriska processer; cytokinnivåer är därför informativa om sjukdomstillstånd associerade med kronisk inflammation, såsom hjärtsjukdomar, autoimmuna sjukdomar och matsmältningssjukdomar. Det antas att bedömning av cytokinnivåer kan kunna skilja mellan inflammatoriska tarmsjukdomar, såsom Crohns sjukdom och ulcerös kolit, och så småningom kan förutsäga resultat i hjärtsjukdomar och reumatoid artrit.