Co je sérum ELISA?

Imunosorbentový test na sérové ​​enzymy (ELISA v séru) je metoda používaná ke stanovení množství biologické látky ve vzorku séra spočívajícím ve specifické interakci mezi antigenem a protilátkou. Příklady požadovaných biologických látek zahrnují protilátku produkovanou v reakci na virovou infekci, jako je protilátka proti viru lidské imunodeficience (HIV), nebo na hormon, který indikuje těhotenství, jako je lidský chorionický gonadotropin (hCG), nebo na autoimunitu protilátka produkovaná při revmatoidní artritidě, jako je revmatoidní faktor. Obecně existuje přímý test, který používá specifickou protilátku k detekci přítomnosti antigenu ve vzorku séra, a nepřímý test, který používá antigen pro stanovení přítomnosti protilátek ve vzorku séra.

V přímém séru ELISA je vzorek obsahující neznámé množství antigenu připojen k imobilnímu povrchu, jako je reakční zkumavka nebo mikrotitrační destička, a je inkubován se specifickou protilátkou, která je chemicky vázána na enzym. Naopak, v nepřímé sérové ​​ELISA je známý antigen připojen k imobilnímu povrchu a potom je inkubován se vzorkem séra, které obsahuje neznámé množství protilátky. Očekává se, že protilátka specifická pro antigen ve vzorku séra se pevně váže na imobilizovaný antigen, zatímco nespecifické protilátky jsou odstraněny v následujících promývacích krocích. Obecně je imobilní povrch ošetřen druhou protilátkou, která rozpoznává neměnnou oblast všech protilátek a která je chemicky spojena s enzymem. V přímé i nepřímé ELISA, poslední krok spočívá v přidání enzymaticky specifického substrátu, iniciaci reakce, která produkuje měřitelný signál, který je přímo úměrný množství antigenu nebo protilátky přítomné ve vzorku séra.

Sérový ELISA je široce používaný test z několika důvodů. A co je nejdůležitější, považuje se za spolehlivý klinický test vzhledem ke specifičnosti interakce antigen-protilátka a citlivost tohoto testu umožňuje detekci biologických látek při extrémně nízkých koncentracích v séru. Je určen k posuzování velkého počtu vzorků současně, a proto se často používá ve velkém měřítku, jako je screening vzorků dárců krve na přítomnost protilátek proti HIV. Kromě toho jsou soupravy ELISA, které měří běžně testované protilátky a antigeny, komerčně dostupné pro použití v klinickém nebo výzkumném prostředí a obvykle obsahují všechna nezbytná činidla pro provedení úplného experimentu.

Rostoucí oblast studie zahrnuje použití technologie sérového ELISA v oblasti detekce cytokinů. Cytokiny jsou rozpustné proteinové molekuly vylučované imunitním systémem, které se často účastní zánětlivých procesů; hladiny cytokinů jsou tedy informativní o chorobných stavech spojených s chronickým zánětem, jako jsou srdeční choroby, autoimunitní onemocnění a nemoci zažívacího traktu. Předpokládá se, že hodnocení hladin cytokinů může být schopno rozlišovat mezi zánětlivými onemocněními střev, jako je Crohnova choroba a ulcerativní kolitida, a nakonec může být schopen předpovídat výsledek srdečních chorob a revmatoidní artritidy.