Co je to sérum ELISA?

Imunosorbent-test sérový enzym spojený s enzymem (sérem ELISA) je metoda používaná k určení množství biologické látky ve vzorku séra spoléháním na specifickou interakci mezi antigenem a protilátkou. Příklady biologických látek, které jsou zajímavé, patří protilátka produkovaná v reakci na virovou infekci, jako je protilátka proti viru lidské imunodeficience (HIV) nebo na hormon, který ukazuje těhotenství, jako je lidský chorionický gonadotropin (HCG), nebo na autoimunitní protilátku, jako je například rheumatotidní faktor. Obecně existuje přímý test, který používá specifickou protilátku k detekci přítomnosti antigenu ve vzorku séra a nepřímý test, který používá antigen k určení přítomnosti protilátek ve vzorku séra.

V přímém séru ELISA je vzorek obsahující neznámé množství antigenu připojen k imobilnímu povrchu, jako je reakční trubice nebo mikrotitrační destička a je inkubována se specifickou protilátkou, která je chemicky spojena s enzymem. Naopak v nepřímé sérové ​​ELISA je známý antigen připojen k imobilnímu povrchu a poté je inkubován se sérovým vzorkem, který obsahuje neznámé množství protilátky. Očekává se, že antigen-specifická protilátka ve vzorku séra se bude pevně vázat na imobilizovaný antigen, zatímco nespecifické protilátky jsou odstraněny v následujících promývacích krocích. Obecně je imobilní povrch ošetřen druhou protilátkou, která rozpoznává nevarující oblast všech protilátek a která je chemicky spojena s enzymem. V přímé i nepřímé ELISA se konečný krok spočívá v přidání enzymově specifického substrátu a zahájí reakci, která vytváří měřitelný signál, který je přímo úměrný množství antigenu nebo protilátky přítomné ve vzorku séra.

Sérum ELISA je široce používaný test z několika důvodů. A co je nejdůležitější,Je považován za spolehlivý klinický test kvůli specificitě interakce antigen-protilátky a citlivost tohoto testu umožňuje detekci biologických látek při extrémně nízkých koncentracích v séru. Je navržen pro posouzení velkého počtu vzorků současně, a tak se často používá při rozsáhlých operacích, jako je screening vzorků dárce krve pro přítomnost HIV protilátek. Kromě toho jsou soupravy ELISA, které měří běžně testované protilátky a antigeny, komerčně dostupné pro použití v klinickém nebo výzkumném prostředí a pohodlně obsahují všechna nezbytná činidla pro provádění úplného experimentu.

Rostoucí oblast studia zahrnuje aplikaci technologie ELISA v séru v oblasti detekce cytokinů. Cytokiny jsou rozpustné proteinové molekuly vylučované imunitním systémem, které se často podílejí na zánětlivých procesech; Hladiny cytokinů jsou proto informativní, pokud jde o chorobové stavy spojené s chronickým zánětem, jako jsou srdeční choroby, autoimunitní onemocnění a trávicí choroby. Předpokládá se, že hodnocení hladin cytokinů může být schopno rozlišovat mezi zánětlivými onemocněními střev, jako je Crohnova choroba a ulcerativní kolitida, a nakonec může být schopno předpovídat výsledek u srdečních chorob a revmatoidní artritidy.