血清ELISAとは何ですか？

血清酵素免疫測定法（血清ELISA）は、抗原と抗体との特異的な相互作用に依存することにより、血清サンプル中の生物学的物質の量を決定するために使用される方法です。 目的の生物学的物質の例には、ヒト免疫不全ウイルス（HIV）に対する抗体などのウイルス感染、またはヒト絨毛性ゴナドトロピン（hCG）などの妊娠を示すホルモン、または自己免疫に応答して産生される抗体が含まれますリウマチ因子などの関節リウマチで産生される抗体。 一般的に、血清サンプル中の抗原の存在を検出するために特定の抗体を使用する直接アッセイ、および血清サンプル中の抗体の存在を決定するために抗原を使用する間接アッセイがあります。

直接血清ELISAでは、未知の量の抗原を含むサンプルを、反応チューブやマイクロタイタープレートなどの固定表面に付着させ、酵素に化学的に結合した特定の抗体とともにインキュベートします。 逆に、間接血清ELISAでは、既知の抗原が不動の表面に付着し、未知の量の抗体を含む血清サンプルとインキュベートされます。 血清サンプル中の抗原特異的抗体は固定化された抗原にしっかりと結合することが期待されますが、非特異的抗体は次の洗浄ステップで除去されます。 一般に、不動の表面は、すべての抗体の不変領域を認識し、酵素に化学的に結合された二次抗体で処理されます。 直接および間接ELISAの両方で、最終ステップは酵素特異的基質の添加から成り、血清サンプル中に存在する抗原または抗体の量に正比例する測定可能なシグナルを生成する反応を開始します。

血清ELISAは、いくつかの理由で広く使用されているテストです。 最も重要なことは、抗原抗体相互作用の特異性により信頼性の高い臨床検査と考えられており、このアッセイの感度により、血清中の極低濃度の生体物質の検出が可能になります。 多数のサンプルを同時に評価するために設計されているため、HIV抗体の存在について血液ドナーサンプルをスクリーニングするなど、大規模な操作でよく使用されます。 さらに、一般的にアッセイされる抗体および抗原を測定するELISAキットは、臨床または研究環境で使用するために市販されており、完全な実験を実施するために必要なすべての試薬が含まれています。

研究の成長分野には、サイトカイン検出の分野での血清ELISA技術の応用が含まれます。 サイトカインは、炎症プロセスに関与することが多い免疫系によって分泌される可溶性タンパク質分子です。 したがって、サイトカインレベルは、心臓病、自己免疫疾患、消化器疾患などの慢性炎症に関連する病状に関して有益です。 サイトカインレベルの評価は、クローン病と潰瘍性大腸炎などの炎症性腸疾患を区別することができ、最終的には心臓病と関節リウマチの結果を予測できると考えられています。