Wat is een serum ELISA?
De serum-enzym-gekoppelde immunosorbent assay (serum ELISA) is een methode die wordt gebruikt om de hoeveelheid van een biologische stof in een serummonster te bepalen door te vertrouwen op de specifieke interactie tussen een antigeen en een antilichaam. Voorbeelden van biologische substanties die van belang zijn, omvatten een antilichaam dat wordt geproduceerd als reactie op een virale infectie, zoals een antilichaam tegen het humaan immunodeficiëntievirus (HIV), of tegen een hormoon dat een zwangerschap aangeeft, zoals humaan choriongonadotrofine (hCG), of tegen een auto-immuunsysteem antilichaam geproduceerd bij reumatoïde artritis, zoals reumafactor. In het algemeen is er een directe test, die een specifiek antilichaam gebruikt om de aanwezigheid van antigeen in een serummonster te detecteren, en een indirecte test, die een antigeen gebruikt om de aanwezigheid van antilichamen in een serummonster te bepalen.
In de directe serum-ELISA wordt een monster met een onbekende hoeveelheid antigeen gehecht aan een immobiel oppervlak, zoals een reactiebuis of een microtiterplaat, en wordt geïncubeerd met een specifiek antilichaam dat chemisch is gekoppeld aan een enzym. Omgekeerd wordt in het indirecte serum ELISA een bekend antigeen gehecht aan een immobiel oppervlak en vervolgens geïncubeerd met het serummonster dat een onbekende hoeveelheid antilichaam bevat. Van het antigeenspecifieke antilichaam in het serummonster wordt verwacht dat het strak aan het geïmmobiliseerde antigeen bindt, terwijl niet-specifieke antilichamen in de volgende wasstappen worden verwijderd. In het algemeen wordt het immobiele oppervlak behandeld met een tweede antilichaam dat het onveranderlijke gebied van alle antilichamen herkent en dat chemisch is gekoppeld aan een enzym. In zowel de directe als indirecte ELISA bestaat de laatste stap uit het toevoegen van een enzymspecifiek substraat, waarbij een reactie wordt geïnitieerd die een meetbaar signaal produceert dat direct evenredig is met de hoeveelheid antigeen of antilichaam in het serummonster.
De serum-ELISA is om verschillende redenen een veel gebruikte test. Het belangrijkste is dat het als een betrouwbare klinische test wordt beschouwd vanwege de specificiteit van de antigeen-antilichaaminteractie, en de gevoeligheid van deze test maakt detectie van biologische stoffen bij extreem lage concentraties in serum mogelijk. Het is ontworpen voor het beoordelen van een groot aantal monsters tegelijkertijd en wordt daarom vaak gebruikt bij grootschalige operaties, zoals het screenen van bloeddonormonsters op de aanwezigheid van HIV-antilichamen. Bovendien zijn ELISA-kits die algemeen geteste antilichamen en antigenen meten commercieel verkrijgbaar voor gebruik in klinische of onderzoeksomgevingen en bevatten ze op geschikte wijze alle noodzakelijke reagentia voor het uitvoeren van een volledig experiment.
Een groeiend onderzoeksgebied omvat de toepassing van serum-ELISA-technologie op het gebied van cytokinedetectie. Cytokines zijn oplosbare eiwitmoleculen die worden afgescheiden door het immuunsysteem en die vaak betrokken zijn bij ontstekingsprocessen; cytokineniveaus zijn daarom informatief met betrekking tot ziektetoestanden geassocieerd met chronische ontsteking, zoals hartaandoeningen, auto-immuunziekten en spijsverteringsziekten. Er wordt gedacht dat de beoordeling van cytokineniveaus mogelijk een onderscheid kan maken tussen inflammatoire darmziekten, zoals de ziekte van Crohn en colitis ulcerosa, en uiteindelijk mogelijk de uitkomst bij hartziekten en reumatoïde artritis kan voorspellen.