Co to jest ELISA w surowicy?

Test immunzymatyczny enzymatyczny w surowicy (surowica ELISA) jest metodą stosowaną do określenia ilości substancji biologicznej w próbce surowicy poprzez opieranie się na specyficznej interakcji między antygenem a przeciwciałem. Przykłady interesujących substancji biologicznych obejmują przeciwciało wytwarzane w odpowiedzi na infekcję wirusową, takie jak przeciwciało przeciwko ludzkiemu wirusowi niedoboru odporności (HIV) lub na hormon, który wskazuje na ciążę, taką jak czynnik gonadotropiny rdzeniowej (HCG), lub na przeciwciała autoimmunologiczne wytwarzane w reumatatoidalnym zapaleniu armii. In general, there is a direct assay, which uses a specific antibody to detect the presence of antigen in a serum sample, and an indirect assay, which uses an antigen to determine the presence of antibodies in a serum sample.

W bezpośredniej ELISA w surowicy próbka zawierająca nieznaną ilość antygenu jest przymocowana do nieruchomej powierzchni, takie jak rurka reakcyjna lub płyta mikrotelekcyjna i jest inkubowana ze specyficznym przeciwciałem, które jest chemicznie połączone z enzymem. I odwrotnie, w pośredniej surowicy ELISA znany antygen jest przymocowany do nieruchomej powierzchni, a następnie inkubowany z próbką surowicy, która zawiera nieznaną ilość przeciwciała. Oczekuje się, że przeciwciało specyficzne dla antygenu w próbce surowicy będzie ściśle wiązać się z unieruchomionym antygenem, podczas gdy nie niespecyficzne przeciwciała są usuwane w poniższych etapach mycia. Zasadniczo powierzchnia nieruchomości jest leczona drugim przeciwciałem, które rozpoznaje niezmienny obszar wszystkich przeciwciał i który jest chemicznie powiązany z enzymem. Zarówno w bezpośrednim, jak i pośredniej ELISA, ostatni krok polega na dodaniu substratu specyficznego dla enzymu, inicjując reakcję, która wytwarza wymierny sygnał, który jest bezpośrednio proporcjonalny do ilości antygenu lub przeciwciała obecnego w próbce surowicy.

ELISA w surowicy jest szeroko stosowanym testem z kilku powodów. Co najważniejsze,Jest to uważane za wiarygodny test kliniczny ze względu na swoistość interakcji antygen-przeciwciało, a czułość tego testu pozwala na wykrycie substancji biologicznych w bardzo niskich stężeniach w surowicy. Jest zaprojektowany do oceny dużej liczby próbek jednocześnie, a zatem jest często stosowany w operacjach na dużą skalę, takich jak badanie próbek dawcy krwi w celu obecności przeciwciał HIV. Ponadto zestawy ELISA, które mierzą powszechnie badane przeciwciała i antygeny, są dostępne w handlu do stosowania w warunkach klinicznych lub badawczych i wygodnie zawierają wszystkie niezbędne odczynniki do przeprowadzenia pełnego eksperymentu.

Rosnący obszar badań obejmuje zastosowanie technologii ELISA w surowicy w obszarze wykrywania cytokin. Cytokiny są rozpuszczalnymi cząsteczkami białka wydzielonymi przez układ odpornościowy, które często są zaangażowane w procesy zapalne; Poziomy cytokin są zatem pouczające dotyczące stanów chorobowych związanych z przewlekłą zapaleniemTion, takie jak choroby serca, choroby autoimmunologiczne i choroby trawienne. Uważa się, że ocena poziomów cytokin może być w stanie rozróżnić choroby zapalne jelit, takie jak choroba Crohna i wrzodziejące zapalenie jelita grubego, i może ostatecznie być w stanie przewidzieć wynik choroby serca i reumatoidalnego zapalenia stawów.