¿Qué es la fluorescencia cuantitativa?
La fluorescencia cuantitativa es la exposición de radiación emitida en un espécimen. Usando tecnología de imagen, un científico puede recopilar información sobre el espécimen y usarla para aprender más sobre su estructura o función. Este enfoque se usa comúnmente en biología para estudiar células individuales y organismos enteros. Requiere acceso a un laboratorio que contiene equipos de microscopía y cámaras de sensibilidad apropiada. Se pueden ver ejemplos de imágenes de esta forma de análisis en libros de texto y documentos científicos, junto con las discusiones de los datos obtenidos.
Las muestras preparadas para imágenes de microscopios pueden tiñarse con etiquetas fluorescentes, como proteínas que se unen a estructuras específicas en la célula. Cuando estas etiquetas se ven a través de una cámara en las condiciones correctas, se iluminan. Simplemente observar la iluminación puede proporcionar información importante para el investigador. Por ejemplo, un inmunólogo que busca rastros de un anticuerpo específico podría usar una etiqueta para identificarla. Este es un ejemplo de QUSFluorescencia alitativa, donde la iluminación proporciona información general sobre las cualidades del espécimen.
En las mediciones de fluorescencia cuantitativa, el investigador recopila información específica y medible. Esto podría incluir datos sobre la intensidad precisa de la luz. El tratamiento adicional del espécimen puede ofrecer oportunidades para técnicas avanzadas de imágenes como la recuperación fluorescente después del foto -blanqueo (FRAP), que proporciona información sobre el movimiento de estructuras dentro de las muestras. Todas estas técnicas de fluorescencia cuantitativa pueden ofrecer una nueva visión de lo que es una estructura, cómo funciona y lo que contiene.
Se requiere equipo de precisión para este tipo de trabajo. Cualquier tratamiento fluorescente agregado a un espécimen debe prepararse cuidadosamente para que etiqueten las estructuras deseadas y nada más. El equipo debe ser apropiadamente sensible y calibrado paraConfirme que está recogiendo información precisa. Si el detector en una cámara digital está desactivada, por ejemplo, puede dejar de recolectar fluorescencia en algunas partes del espécimen, o podría generar una lectura falsa. En ambos casos, los datos serían incorrectos.
Los laboratorios de patología pueden usar fluorescencia cuantitativa para la evaluación de algunos especímenes. Esta técnica también se usa ampliamente en la investigación. Se pueden desarrollar algunas imágenes muy llamativas con la ayuda de etiquetas fluorescentes para separar estructuras como nervios o proteínas específicas. Además de ser visualmente notables, las imágenes pueden contener una gran cantidad de información para los investigadores con la capacidad de leerlas. Es posible analizar imágenes de fluorescencia cuantitativa con programas de computadora avanzados para extraer más datos y generar resultados significativos.