Qu'est-ce que la fluorescence quantitative?
La fluorescence quantitative est l'exposition du rayonnement émis dans un échantillon. À l'aide de la technologie d'imagerie, un scientifique peut collecter des informations sur le spécimen et l'utiliser pour en apprendre davantage sur sa structure ou sa fonction. Cette approche est couramment utilisée en biologie pour étudier des cellules individuelles et des organismes entiers. Il nécessite l’accès à un laboratoire contenant un équipement de microscopie et des caméras d’une sensibilité appropriée. Des exemples d'images de cette forme d'analyse peuvent être vus dans des manuels et des articles scientifiques, ainsi que des discussions sur les données obtenues.
Les échantillons préparés pour l'imagerie au microscope peuvent être colorés avec des étiquettes fluorescentes, comme des protéines qui s'attachent à des structures spécifiques dans la cellule. Lorsque ces balises sont vues par une caméra dans les bonnes conditions, elles s’allument. Le simple fait d’observer l’éclairage peut fournir des informations importantes au chercheur. Par exemple, un immunologiste à la recherche de traces d'un anticorps spécifique pourrait utiliser une étiquette pour l'identifier. Ceci est un exemple de fluorescence qualitative, où l'éclairage fournit des informations générales sur les qualités de l'échantillon.
Dans les mesures de fluorescence quantitative, le chercheur collecte des informations spécifiques et mesurables. Cela pourrait inclure des données sur l'intensité précise de la lumière. Un traitement plus poussé du spécimen peut offrir des possibilités pour des techniques d'imagerie avancées telles que la récupération fluorescente après photoblanchiment (FRAP), qui fournit des informations sur le mouvement des structures à l'intérieur des spécimens. Toutes ces techniques quantitatives de fluorescence peuvent donner un nouvel aperçu de ce qu’est une structure, de son fonctionnement et de ce qu’elle contient.
Un équipement de précision est nécessaire pour ce type de travail. Tous les traitements fluorescents ajoutés à un échantillon doivent être soigneusement préparés afin qu'ils ne marquent pas les structures souhaitées. L'équipement doit être suffisamment sensible et calibré pour confirmer qu'il capte des informations précises. Si le détecteur d’une caméra numérique est éteint, par exemple, il peut ne pas collecter de fluorescence dans certaines parties de l’échantillon ou générer une lecture erronée. Dans les deux cas, les données seraient incorrectes.
Les laboratoires de pathologie peuvent utiliser la fluorescence quantitative pour évaluer certains échantillons. Cette technique est également largement utilisée dans la recherche. Certaines images très frappantes peuvent être développées à l'aide d'étiquettes fluorescentes pour séparer des structures telles que des nerfs ou des protéines spécifiques. En plus d'être remarquables visuellement, les images peuvent contenir une mine d'informations pour les chercheurs ayant la capacité de les lire. Il est possible d'analyser des images quantitatives de fluorescence avec des programmes informatiques avancés pour extraire plus de données et générer des résultats significatifs.