Hvad er kvantitativ fluorescens?
Kvantitativ fluorescens er udstillingen med stråling udsendt i en prøve. Ved hjælp af billeddannelsesteknologi kan en videnskabsmand indsamle oplysninger om prøven og bruge den til at lære mere om dens struktur eller funktion. Denne fremgangsmåde bruges ofte i biologi til at studere individuelle celler og hele organismer. Det kræver adgang til et laboratorium, der indeholder mikroskopiudstyr og kameraer med passende følsomhed. Eksempler på billeder fra denne form for analyse kan ses i lærebøger og videnskabelige artikler sammen med diskussioner af de opnåede data.
Prøver, der er forberedt til mikroskopafbildning, kan farves med fluorescerende mærker som proteiner, der fastgøres til specifikke strukturer i cellen. Når disse tags vises gennem et kamera under de rigtige forhold, lyser de. Bare at observere belysningen kan give vigtige oplysninger til forskeren. For eksempel kan en immunolog, der leder efter spor efter et specifikt antistof, bruge et mærke til at identificere det. Dette er et eksempel på kvalitativ fluorescens, hvor belysningen giver generel information om prøvens kvaliteter.
I målinger af kvantitativ fluorescens indsamler forskeren specifik, målbar information. Dette kan omfatte data om lysets nøjagtige intensitet. Yderligere behandling af prøven kan give muligheder for avancerede billeddannelsesteknikker som fluorescerende genopretning efter fotoblegning (FRAP), som giver information om bevægelse af strukturer inde i prøver. Alle disse kvantitative fluorescens-teknikker kan give ny indsigt i, hvad en struktur er, hvordan den fungerer, og hvad den indeholder.
Der kræves præcisionsudstyr til denne type arbejde. Eventuelle fluorescerende behandlinger, der tilføjes til en prøve, skal udarbejdes omhyggeligt, så de mærker de ønskede strukturer og intet andet. Udstyret skal være passende følsomt og kalibreret for at bekræfte, at det samler nøjagtige oplysninger. Hvis detektoren i et digitalt kamera er slukket, for eksempel, kan den muligvis ikke opsamle fluorescens i nogle dele af prøven, eller det kan generere en falsk aflæsning. I begge tilfælde ville dataene være forkerte.
Patologilaboratorier kan bruge kvantitativ fluorescens til evaluering af nogle prøver. Denne teknik er også meget anvendt i forskning. Nogle meget slående billeder kan udvikles ved hjælp af fluorescerende tags for at adskille strukturer som nerver eller specifikke proteiner. Ud over at være visuelt bemærkelsesværdige, kan billederne indeholde et væld af information til forskere med mulighed for at læse dem. Det er muligt at analysere kvantitative fluorescensbilleder med avancerede computerprogrammer for at udtrække flere data og generere meningsfulde resultater.