ユビキチンアッセイとは何ですか？

ユビキチン化とは、3つの異なる酵素によるタンパク質ユビキチンの他のタンパク質への結合を指します。ユビキチン化アッセイは、セル内でこのプロセスのどれだけが発生するかを決定するテストです。テストを使用して、異なる条件がタンパク質結合、ユビキチンネーション経路で重要なステップと構造にどのように影響するかを判断することができます。不十分または過剰な量は、多くの異なる疾患の発症に関連しています。cells細胞に見られるタンパク質、ユビキチンの機能は、他の構造へのタグまたは信号として機能しながらタンパク質に結合することです。このタグは、タンパク質を破壊、リサイクル、または移動できることを知るために酵素を知らせます。その結果、タンパク質の破壊または輸送が可能です。これらのタグ付けタンパク質は、DNA修復、ウイルス感染、免疫応答に重要です。他の重要な機能には、細胞死、細胞分裂、細胞の発達における役割が含まれます。ユビキチンが多すぎる、またはその欠如は、がん、遺伝的障害、免疫系の疾患など、多くの疾患の形成に役割を果たす可能性があります。

研究者はユビキチン化アッセイを使用して、どの条件が細胞内のタンパク質の濃度を変化させ、病気の細胞と健康な細胞を比較するかを決定しようとします。科学者はまた、それを使用して、どの条件が結合の変化を引き起こすかを調査します。さらに、特定のDNAコードを細胞内の酵素の量とリンクしようとする場合があります。Ubiquintinに結合したタンパク質の割合を決定します。別の人は、酵素の活性またはユビキチン経路で見つかった他の中間体の存在を調べます。ユビキチンが結合する標的タンパク質に基づいて、異なるアッセイが開発されています。ubiquitationユビキチン化アッセイの基礎は、別の簡単に測定された化学物質を使用して標識される化合物を組み込むことです。腫瘍学的アッセイでは、ユビキチンは、2つの窒素原子を含む化合物であるクリプト酸塩で標識できます。これを使用して、どの酵素が細胞で最も活性であるかを判断することができます。1つ目は、酵素が標識ユビキチンを標的タンパク質に結合する酵素ステップです。2番目は、抗体などのコンジュゲートを使用して標的タンパク質の結合を調べる検出ステップです。抗体は蛍光または色を変化させるため、研究者は酵素の活性を決定できます。