인산화 수준은 어떻게 결정됩니까?

유기 분자 또는 물질의 인산화 수준은 웨스턴 블 롯팅 및 질량 분석법의 두 가지 방법으로 결정됩니다. 인산화는 대부분 단백질에 인산염의 부착을 나타냅니다. 인산염이 단백질에 부착되면 인체 내 단백질 효소의 자연적인 과정과 기능이 방해를받습니다. 인산화 수준을 결정하는 것은 암에서 당뇨병에 이르기까지 광범위한 질병을 치료하는 데 중요합니다.

웨스턴 블 롯팅은 특정 단백질 세트의 인산화 수준을 결정하는데 사용되는 대중적인 방법이다. 항-포스 포-티로신 모노클로 날 항체와 같은 항체는 인산화에 영향을받는 단백질의 티로신 잔기에 쉽게 결합하기 때문에 일반적으로 사용됩니다. 웨스턴 블 롯팅에서, 단백질은 먼저 겔 전기 영동으로 알려진 전하 방법을 사용하여 크기별로 분리된다.

이어서 단백질을 단백질의 포스페이트에 결합하는 특수 항체로 덮인 막으로 옮긴다. 단백질이 이동되면, 항체는 인산염이 부착 된 모든 단백질에 달라 붙습니다. 이어서, 인산화 수준은 막의 x- 선에 의해 결정될 수있다. 영향을받는 단백질은 모두 빛을 발산하여 연구원이 인산화 수준을보다 쉽게 ​​측정 할 수 있도록합니다.

질량 분석법은 물질의 인산화 수준을 측정하는 또 다른 방법입니다. 이 과정은 단백질 분자를 이온으로 변환하여 추적 및 측정이 쉬워집니다. 시료는 전자로 시료를 침수시키는 고출력 이온 소스로 이온화됩니다. 이 동작은 샘플을 양이온으로 하전 된 양이온으로 만듭니다.

질량 분석기의 질량 분석기는 이온을 질량과 전하 강도로 분리합니다. 이를 통해 연구원은 질량 대 전하 비율을 발견 할 수 있으며 이는 샘플의 인산화 수준을 발견하는 데 중요합니다. 마지막으로, 검출기는 데이터를 차트 형태로 표시 할 수 있도록 이온을 순서대로 측정합니다. 차트는 x 축 이온의 질량 대 전하 비율과 y 축 이온의 상대 강도를 보여줍니다.

인산화 수준은 또한 기질 인산화 동안 측정 될 수있다. 기질 인산화는 해당 과정 동안 세포들 사이의 에너지 전달에 중요한 분자 인 아데노신 트리 포스페이트 (ATP)를 생성하는 공정이다. 이 과정은 동물 세포와 식물 세포 모두에서 발생합니다.

식물 세포에서 ATP 분자는 태양 에너지를 사용하여 생성됩니다. 이 에너지는 식물의 광합성 부위 인 식물의 엽록체에서 인산화를 촉진합니다. 인산화 수준은 추가 ATP 분자를 생성하는 데 필요한 인산염의 양과 관련이 있습니다.