재조합 플라스미드 란?

플라스미드는 많은 박테리아에서 발견되는 원형의 DNA 조각입니다. 플라스미드의 가장 주목할만한 특징은 숙주의 주요 DNA와 독립적으로 복제된다는 것입니다. 플라스미드는 종종 재조합 클로닝 기술에 사용되어 새로 분리 된 유전자를 클로닝합니다. 재조합 플라스미드를 사용하여 RNA 또는 단백질을 수득하기 위해 다량의 공지 된 유전자를 발현시키는 것도 매우 일반적이다. 이러한 재조합 유전자 발현은 생명 공학 산업에 필수적이다.

재조합 플라스미드는 박테리아 세계의 대장균 인 대장균 에서 처음으로 개발되었습니다. 많은 다른 유형의 박테리아가 그러한 플라스미드를 보유 할 수 있습니다. 이러한 자기 복제 DNA 비트는 다른 유형의 박테리아간에 자연적으로 전달 될 수 있습니다. 그럼에도 불구하고 때로는 재조합 플라스미드를 다른 종류의 박테리아에 도입하는 것이 어려웠습니다.

DNA를 다른 세포에 도입하는 주요 절차는 형질 전환으로 알려져 있는데,이 박테리아는 박테리아가 외부 DNA를 흡수 할 가능성이 높은 화학 물질로 처리됩니다. 다른 기술은 전류로 박테리아를 충격시키는 것입니다. 이것을 전기 천공 법이라고합니다.

재조합 플라스미드를 생성하는 이유는 다양하다. DNA가 특정 조직이나 유기체에서 처음 분리 될 때 종종 플라스미드로 변형되어 라이브러리를 만듭니다. 그런 다음 개별 식민지에서 DNA를 추출 할 수 있습니다. 다음으로, 서열이 데이터베이스에 존재하는 경우, 어떤 유형의 유전자가 존재 하는지를 결정하기 위해 DNA 시퀀싱에 의해 스크리닝 될 수있다. 때로는 알려지지 않은 기능을 가진 유전자가 복제됩니다.

다른 경우에, 유전자 산물은 잘 알려져 있지만, 연구자들은 추가 연구를 위해 다량의 유전자 산물을 발현하기를 원합니다. 유전자는 과발현 벡터 인 재조합 플라스미드로 클로닝 될 수있다. 그들은 특히 다량의 RNA 또는 단백질을 생산하도록 설계되었습니다. 이것은 이전에는 종종 시체에서만 얻을 수 있었던 재조합 인간 단백질에 특히 유용하여 특정 유전자의 기능을 연구하는 것이 매우 어렵습니다.

분자 클로닝에 사용될 수있는 플라스미드를 구축하는 데 몇 가지 요인이 관련된다. 플라스미드에는 선택 가능한 마커가 있어야합니다. 이것은 유전자를 갖는 세포를 선택할 수있게한다. 일반적으로, 마커가있는 유전자가 결여 된 세포의 집단은 그것을 운반하는 세포의 수보다 훨씬 더 많다. 일반적으로 재조합 플라스미드는 항생제에 대한 내성을 갖거나 특정 아미노산의 부재 하에서 성장할 수있다.

이러한 플라스미드는 복제 기원을 필요로하여 재조합 DNA의 합성을 시작할 수있다. 또한, 재조합 플라스미드는 제한 효소가 DNA를 절단하여 유전자가 클로닝 벡터에 삽입 될 수있게하는 일련의 특수 서열을 필요로한다. 유전자가 시작하고 끝나는 곳에 존재해야하는 특정 DNA 서열에 고도로 특화된 많은 제한 효소가 있습니다.

박테리아의 전통적인 균주는 수십 년 동안 DNA 복제에 사용되어 왔습니다. 또한, 유전자 산물의 과발현을 촉진하기 위해 특별히 구성된 박테리아 균주를 사용하는 새로운 키트가 있습니다. 유전자 복제 기술과 재조합 플라스미드에 복제 된 유전자에서 발현 된 단백질을 쉽게 정제 할 수있는 방법을 결합합니다.