O que é um vetor de clonagem?
Um vetor de clonagem é um segmento de DNA que pode ser usado como transportador de DNA estranho, para que o DNA estranho possa ser introduzido nas células. Uma vez que o vetor de clonagem é adicionado a uma célula, o DNA estranho pode começar a se replicar, produzindo numerosas cópias do DNA estranho que podem ser usadas para vários propósitos. Vários laboratórios vendem comercialmente vetores de clonagem genéricos que podem ser usados em pesquisas e as pessoas também podem criar seus próprios projetos específicos.
Vários organismos podem ser usados como fontes para vetores de clonagem. Alguns são criados sinteticamente, como no caso de cromossomos artificiais de levedura e cromossomos artificiais bacterianos, enquanto outros são retirados de bactérias e bacteriófagos. Em todos os casos, o vetor precisa ser geneticamente modificado para acomodar o DNA estranho, criando um local de inserção onde o novo DNA se encaixará.
Um vetor de clonagem deve ter um local de inserção que possa idealmente acomodar muitas cadeias diferentes de DNA estranho, permitindo que os pesquisadores usem o vetor para diferentes projetos. Ele também precisa de uma sequência de DNA que permita que ele se propague assim que for inserido na célula-alvo, e precisa de um marcador que os pesquisadores possam usar para encontrar o DNA estranho assim que o vetor de clonagem começar a se propagar. A resistência aos antibióticos é escolhida classicamente como um marcador para que as células possam ser introduzidas em um antibiótico que mata células sem o DNA estranho, deixando os clones para trás.
Vetores para clonagem podem ser usados em muitos campos da pesquisa científica. Eles podem ser usados para duplicar uma fita de DNA para fins de pesquisa e investigação adicional, como é feito quando as pessoas testam o DNA em um laboratório forense ou quando as pessoas procuram genes defeituosos que podem ser responsáveis por condições genéticas. Os vetores de clonagem também são usados na engenharia genética, pois permitem que as pessoas manipulem o DNA e façam inúmeras cópias do DNA alterado.
Trabalhar com vetores de clonagem requer um laboratório com equipamento que permita às pessoas manipularem o DNA. O uso de um vetor de clonagem de estoque de um laboratório pode reduzir a quantidade de tempo necessária para desenvolver um vetor, mas os pesquisadores ainda precisam ser capazes de selecionar a cadeia de DNA estranho que desejam inserir e integrá-la ao vetor de clonagem com a assistência de enzimas de restrição que separam as cadeias de DNA no vetor para permitir a inserção ou "ligação" do novo DNA.