Che cos'è un vettore di clonazione?
Un vettore di clonazione è un segmento di DNA che può essere utilizzato come supporto per il DNA estraneo, in modo che il DNA estraneo possa essere introdotto nelle cellule. Una volta aggiunto il vettore di clonazione a una cellula, il DNA estraneo può iniziare a replicarsi, producendo numerose copie del DNA estraneo che può essere utilizzato per vari scopi. Numerosi laboratori vendono commercialmente vettori di clonazione generici che possono essere utilizzati nella ricerca e le persone possono anche creare i propri per progetti specifici.
Numerosi organismi possono essere utilizzati come fonti per i vettori della clonazione. Alcuni sono creati sinteticamente, come nel caso dei cromosomi artificiali del lievito e dei cromosomi artificiali batterici, mentre altri sono presi da batteri e batteriofagi. In tutti i casi, il vettore deve essere geneticamente modificato per accogliere il DNA estraneo creando un sito di inserimento in cui il nuovo DNA si adatterà.
Un vettore di clonazione deve avere un sito di inserimento che può idealmente ospitare molti diversi filamenti di DNA estraneo, consentendo ai ricercatori di utilizzare il vettore per diversi progetti. Ha anche bisogno di una sequenza di DNA che gli permetta di propagarsi quando viene inserito nella cellula bersaglio, e ha bisogno di un marcatore che i ricercatori possano usare per trovare il DNA estraneo una volta che il vettore di clonazione inizia a propagarsi. La resistenza agli antibiotici è classicamente scelta come marker in modo che le cellule possano essere introdotte in un antibiotico che ucciderà le cellule senza il DNA estraneo, lasciando indietro i cloni.
I vettori per la clonazione possono essere utilizzati in molti campi della ricerca scientifica. Possono essere usati per duplicare un filamento di DNA a scopo di ricerca e approfondimento, come avviene quando le persone testano il DNA in un laboratorio forense o quando sono alla ricerca di geni difettosi che potrebbero essere responsabili di condizioni genetiche. I vettori della clonazione sono anche usati nell'ingegneria genetica, poiché consentono alle persone di manipolare il DNA e fare numerose copie del DNA alterato.
Lavorare con i vettori della clonazione richiede un laboratorio con attrezzature che consentano alle persone di manipolare il DNA. L'uso di un vettore di clonazione stock da un laboratorio può ridurre la quantità di tempo necessaria per sviluppare un vettore, ma i ricercatori devono ancora essere in grado di selezionare il filamento di DNA estraneo che desiderano inserire e integrarlo nel vettore di clonazione con l'assistenza di enzimi di restrizione che separano i filamenti di DNA nel vettore per consentire l'inserimento o la "legatura" del nuovo DNA.