Co je testování pyrogenů?

Testování pyrogenů definuje proces používaný výrobci léčiv k určení, zda jsou bakteriální toxiny přítomny ve vakcínách a lécích, které by při použití na lidech mohly vyvolat horečku. Určuje, zda jsou mikroby nebo jejich metabolity přítomny v intravenózních roztocích během výrobního procesu. Nejběžnější a nejstarší forma pyrogenového testování spočívá v injekčním podání léků králíkům, aby se určilo, zda se objeví horečka. Novější test používá krev z podkovy k testování na toxiny.

Metoda testování králičích pyrogenů se vynořila ve 40. letech 20. století poté, co někteří pacienti onemocněli intravenózními léky. Hypodermická zařízení se v té době ukázala jako užitečná pro podávání léků přímo do krevního řečiště u pacientů, kteří nebyli schopni tolerovat orální léky. Přestože hypodermická zařízení byla sterilní, léky nebyly vždy bezpečné.

U pacientů se někdy objevily vysoké horečky, zimnice a bolesti těla a někteří lidé utrpěli šok. Lékaři nevěděli, proč k tomu došlo, často nazývali stav injekční horečka, slaná horečka nebo horečka destilované vody. Vědci později objevili, že některé léky a vakcíny byly kontaminovány ve výrobních laboratořích pyrogenními endotoxiny, silnými bakteriemi, které odolávají sterilizaci.

Lidské tělo bojuje s expozicí bakteriálním toxinům v životním prostředí skrz kůži. Když jsou kontaminované drogy vstříknuty do krevního řečiště, toxiny obcházejí normální obranné mechanismy. Bílé krvinky začnou uvolňovat další formu pyrogenu, která způsobuje vysokou horečku, která by mohla vést k šoku a smrti.

Testování pyrogenů v lékových laboratořích zahrnuje topná zařízení používaná k zajištění sterilizace. Lék se vstřikuje do ušních žil králíků, aby se zjistilo, zda se rozvine horečka. Rektální teploty testovaných zvířat se analyzují po 30 minutách a znovu o jednu až tři hodiny později. Pokud zvířata zůstávají bez horečky, roztok neobsahuje toxiny.

Proces testování pyrogenů na zvířatech obvykle zahrnuje injekci několika králíků najednou v časovém rámci 10 minut. Dávka pro každého králíka závisí na tělesné hmotnosti, věku a pohlaví. Stejná skupina králíků by mohla být testována opakovaně každých několik dní, dokud si nevyvolají toleranci k lékům.

Novější technika testování pyrogenů se nazývá limulus amoebocyte lysate (LAL). Krev z krabů podkovy obsahuje vysoké hladiny toxinů, které se přirozeně vyskytují v mořském životě. Vědci objevili způsob, jak používat krev k testování bakteriálního toxinu v drogách a surovinách používaných k výrobě medicíny. Postup testování LAL pyrogenem může být 100krát citlivější než metody testování králíků. Zdravotnické prostředky, které jsou implantovány do lidí, procházejí testem LAL, radioaktivními drogami a anestézií.