Che cos'è il test pirogeno?
I test pirogeni definiscono un processo utilizzato dai produttori di farmaci per determinare la presenza di tossine batteriche nei vaccini e nei farmaci che potrebbero causare febbre se utilizzati sull'uomo. Determina se i microbi o i loro metaboliti sono presenti nelle soluzioni endovenose durante il processo di fabbricazione. La forma più comune e più antica di test pirogeni consiste nell'iniezione di farmaci nei conigli per determinare se si sviluppa una febbre. Un nuovo test utilizza il sangue del granchio a ferro di cavallo per verificare le tossine.
Il metodo del test pirogeno del coniglio emerse negli anni '40 dopo che alcuni pazienti si ammalarono di droghe per via endovenosa. I dispositivi ipodermici all'epoca si sono dimostrati utili per la somministrazione di farmaci direttamente nel flusso sanguigno per i pazienti che non erano in grado di tollerare i farmaci per via orale. Sebbene i dispositivi ipodermici fossero sterili, i farmaci non erano sempre sicuri.
A volte i pazienti hanno sviluppato febbre alta, brividi e dolori muscolari e alcune persone hanno subito shock. I medici non sapevano perché ciò accadesse, spesso chiamando la condizione febbre da iniezione, febbre salina o febbre da acqua distillata. I ricercatori hanno scoperto in seguito che alcuni farmaci e vaccini sono stati contaminati nei laboratori di produzione con endotossine pirogene, potenti batteri che resistono alla sterilizzazione.
Il corpo umano combatte l'esposizione alle tossine batteriche nell'ambiente attraverso la pelle. Quando i farmaci contaminati vengono iniettati nel flusso sanguigno, le tossine bypassano i normali meccanismi di difesa. I globuli bianchi iniziano a rilasciare un'altra forma di pirogeno che provoca febbre alta, che potrebbe portare a shock e morte.
I test pirogeni nei laboratori farmaceutici prevedono apparecchiature di riscaldamento utilizzate per garantire la sterilizzazione. Il farmaco viene iniettato nelle vene dell'orecchio dei conigli per vedere se si sviluppa una febbre. Le temperature rettali degli animali da test vengono analizzate dopo 30 minuti e di nuovo da una a tre ore dopo. Se gli animali rimangono privi di febbre, la soluzione è priva di tossine.
Il processo di test pirogeno su animali in genere comporta l'iniezione di più conigli alla volta in un intervallo di 10 minuti. Il dosaggio per ogni coniglio dipende dal peso corporeo, dall'età e dal sesso. Lo stesso gruppo di conigli potrebbe essere testato ripetutamente ogni pochi giorni fino a quando non sviluppano una tolleranza ai farmaci.
Una nuova tecnica di test pirogeno si chiama test LAL (limulus amoebocyte lysate). Il sangue dei granchi a ferro di cavallo contiene alti livelli di tossine presenti naturalmente nella vita marina. Gli scienziati hanno scoperto un modo per utilizzare il sangue per testare la tossina batterica nei farmaci e le materie prime utilizzate per fabbricare la medicina. La procedura di test del pirogeno LAL potrebbe essere 100 volte più sensibile dei metodi di test del coniglio. I dispositivi medici che vengono impiantati nell'uomo vengono sottoposti a test LAL, insieme a farmaci radioattivi e anestesia.