¿Qué es la prueba de pirógenos?
La prueba de pirógenos define un proceso utilizado por los fabricantes de medicamentos para determinar si las toxinas bacterianas están presentes en las vacunas y los medicamentos que pueden causar fiebre cuando se usan en humanos. Determina si los microbios o sus metabolitos están presentes en soluciones intravenosas durante el proceso de fabricación. La forma más común y más antigua de prueba de pirógenos consiste en inyectar drogas en conejos para determinar si se desarrolla fiebre. Una prueba más nueva usa sangre del cangrejo herradura para detectar toxinas.
El método de prueba de pirógenos de conejo apareció en la década de 1940 después de que algunos pacientes se enfermaran por drogas intravenosas. Los dispositivos hipodérmicos en el momento demostraron ser útiles para administrar medicamentos directamente en el torrente sanguíneo para pacientes que no podían tolerar los medicamentos orales. Aunque los dispositivos hipodérmicos eran estériles, las drogas no siempre eran seguras.
Los pacientes a veces desarrollaron fiebres altas, escalofríos y dolores corporales, y algunas personas sufrieron conmoción. Los médicos no sabían por qué ocurría esto, y frecuentemente llamaban a la condición fiebre de inyección, fiebre salina o fiebre del agua destilada. Más tarde, los investigadores descubrieron que algunas drogas y vacunas estaban contaminadas en los laboratorios de producción con endotoxinas pirógenas, bacterias potentes que resisten la esterilización.
El cuerpo humano combate la exposición a toxinas bacterianas en el medio ambiente a través de la piel. Cuando se inyectan drogas contaminadas en el torrente sanguíneo, las toxinas eluden los mecanismos de defensa normales. Los glóbulos blancos comienzan a liberar otra forma de pirógeno que causa fiebre alta, lo que puede provocar shock y la muerte.
Las pruebas de pirógenos en laboratorios de drogas implican equipos de calefacción utilizados para garantizar la esterilización. El medicamento se inyecta en las venas del oído de los conejos para ver si se desarrolla fiebre. Las temperaturas rectales de los animales de prueba se analizan después de 30 minutos y nuevamente una o tres horas más tarde. Si los animales permanecen sin fiebre, la solución está libre de toxinas.
El proceso de prueba de pirógenos en animales generalmente implica inyectar varios conejos a la vez dentro de un marco de tiempo de 10 minutos. La dosis para cada conejo depende del peso corporal, la edad y el género. El mismo grupo de conejos podría analizarse repetidamente cada pocos días hasta que desarrollen una tolerancia a las drogas.
Una nueva técnica de prueba de pirógenos se llama prueba de lisado de lisado de amebocitos (LAL). La sangre de los cangrejos herradura contiene altos niveles de toxinas que se encuentran naturalmente en la vida marina. Los científicos descubrieron una forma de usar la sangre para detectar toxinas bacterianas en las drogas y las materias primas utilizadas para fabricar medicamentos. El procedimiento de prueba de pirógenos LAL podría ser 100 veces más sensible que los métodos de prueba de conejos. Los dispositivos médicos que se implantan en humanos se someten a pruebas de LAL, junto con medicamentos radioactivos y anestesia.