Hvad er et konfokalt mikroskop?

Et konfokalt mikroskop er et bestemt slags fluorescerende mikroskop, der bruges til at opnå 2D- og 3D-billeder af høj kvalitet. Med et grundlæggende (bredt felt) fluorescerende mikroskop, lyses lys af en bestemt bølgelængde, er skinnende på et eksemplar, og prøven absorberer noget af det lys og afspejler resten af ​​det ved en længere bølgelængde. Den længere bølgelængde lys passerer gennem et dikroisk spejl, der tillader det længere bølgelængde lys, men ikke den originale (kortere) bølgelængde lys at passere. Den person, der ser prøven, ser kun lyset, der er gået gennem det dikroiske spejl. Grundlæggende fluorescerende mikroskoper fanger både i fokus og out-of-fokus-lys, hvilket fungerer godt for store prøver, hvor meget høj opløsning ikke er påkrævet. Det fungerer ikke så godt til at se fine detaljer. Et konfokalt mikroskop er nødvendigt for at fange fluorescerende billeder med høj opløsning.

Det konfokale mikroskop bruger et pinhole til at afvise lys. I stedet for lys, der kun passerer gennem et dichRoic Mirror, lys overføres både gennem et dikroisk spejl og et pinhole, hvilket betyder, at den person, der ser prøven, kun ser et enkelt punkt i prøven. For at se en hel prøve scanner bevægelige spejle lys over et rektangulært plan af prøven, og en computer indsamler det udsendte lys, når prøven bliver scannet. En komplet scanning vil resultere i en optisk skive eller tværsnit af prøven. Denne type mikroskopi kaldes konfokal laserskanningsmikroskopi, delvis fordi en laser bruges som lyskilde.

For at oprette et 3D -billede er flere scanninger udført, hvilket skaber flere "skiver" af prøven, og en computer kombinerer hver skive for at skabe et tredimensionelt billede. Mikroskopet kan programmeres til at variere mellemrummet mellem skiver, afhængigt af hvor sprødt et 3D -billede brugeren ønsker at få. Mikroskopet kan også variere den hastighed, hvorpå det scanner et billede,med langsom scanning, der giver højere opløsning end hurtig scanning.

Det konfokale mikroskop er blevet et meget almindeligt anvendt udstyr i mange livsvidenskabelige laboratorier. De er dyre og noget store og har ofte værelser dedikeret til deres anvendelse, fordi rummet skal være mørkt for at få et godt fluorescerende billede. Selvom konfokale mikroskoper oftest bruges til at se celler og strukturer inden for celler, kan de bruges til at opnå et billede af ethvert tredimensionelt fluorescerende eksemplar og bruges undertiden til at se halvledermaterialer.