Hvad er et konfokalt mikroskop?

Et konfokalt mikroskop er en bestemt type fluorescerende mikroskop, der bruges til at få 2D- og 3D-billeder i høj kvalitet. Med et grundlæggende (bredt felt) fluorescerende mikroskop, lyser en bestemt bølgelængde på et eksemplar, og prøven absorberer noget af det lys og reflekterer resten af ​​det på en længere bølgelængde. Det længere lys med bølgelængde passerer gennem et dikroisk spejl, som gør det muligt for det længere bølgelængdelys, men ikke det originale (kortere) bølgelængdelys at passere igennem. Personen, der ser prøven, ser kun lyset, der er passeret gennem det dikroiske spejl. Grundlæggende fluorescerende mikroskoper fanger både fokus og uden fokus, hvilket fungerer godt til store prøver, hvor der ikke kræves meget høj opløsning. Det fungerer ikke så godt til at se fine detaljer. Et konfokalt mikroskop er nødvendigt for at optage lysstofrør i høj opløsning.

Det konfokale mikroskop bruger et pinhole til at afvise ud af fokuslyset. I stedet for at lys kun passerer gennem et dikroisk spejl, passeres lys gennem både et dikroisk spejl og et pinhul, hvilket betyder, at den person, der ser prøven, kun ser et enkelt punkt i prøven. For at se en hel prøve scanner bevægelige spejle lys over et rektangulært plan af prøven, og en computer opsamler det udsendte lys, når prøven bliver scannet. En komplet scanning resulterer i en optisk skive eller tværsnit af prøven. Denne type mikroskopi kaldes konfokal laserscanningsmikroskopi, delvis fordi en laser bruges som lyskilde.

For at oprette et 3D-billede udføres flere scanninger, der oprettes flere "skiver" af prøven, og en computer kombinerer hver skive for at oprette et tredimensionelt billede. Mikroskopet kan programmeres til at variere mellemrummet mellem skiverne, afhængigt af hvor skarpt et 3D-billede brugeren ønsker at få. Mikroskopet kan også variere hastigheden, hvormed det scanner et billede, med langsom scanning, der giver højere opløsning end hurtig scanning.

Det konfokale mikroskop er blevet et meget almindeligt brugt udstyr i mange livsvidenskabelige laboratorier. De er dyre og noget store og har ofte værelser, der er dedikeret til deres brug, fordi rummet skal være mørkt for at få et godt lysstofrør. Selvom konfokale mikroskoper oftest bruges til at se celler og strukturer inden i celler, kan de bruges til at opnå et billede af et hvilket som helst tredimensionelt fluorescerende eksemplar og bruges undertiden til at se halvledermaterialer.