Was ist ein Antikörperkonjugat?
Ein Antikörper -Konjugat ist ein Markierungsmolekül, das in histologischen oder enzymatischen Antigen -Nachweis -Assays verwendet werden kann, um gebundene Antikörper zu lokalisieren. Es funktioniert, indem es physisch an den Antikörper angeschlossen oder konjugiert wird, der verwendet wird, um ein Interesse antigen zu markieren. Ein Antikörper, der auf ein Antikörper -Konjugat markiert ist, ist ein Werkzeug, das häufig in der Forschung verwendet wird, um entweder den genauen Ort oder die Menge an Proteinen oder Antigenen von Interesse zu identifizieren, gegen die der Antikörper oder die Antikörper angehoben wurden. Durch die Exposition eines Antigens oder eines Proteins, das interessiert einem Antikörper, der gegen es angehoben wurde, können Antigene oder Proteine markiert werden. Durch die Verwendung eines Antikörper -Konjugats - dh ein Antikörper, der an ein Molekül konjugiert wurdeD. Die häufigste Art von Antikörperkonjugat ist ein fluoreszierendes Molekül, das die Identifizierung von Antigenen im Gewebe unter einem fluoreszierenden Mikroskop ermöglicht. Andere Konjugate umfassen Moleküle wie Pferdie -Radieschenperoxidase, die in Konjugation mit Antikörpern für die spätere Entwicklung mit Diaminobenzidin (DAB) verwendet werden.
häufig werden primäre Antikörper gegen bestimmte Antigene angehoben, während sekundäre Antikörper an markierte Moleküle konjugiert und gegen den primären Antikörper angehoben werden. Zum Beispiel könnte man daran interessiert sein, ein Antigen namens Antigen X zu identifizieren. Man würde dann verwenden, zum Beispiel einen Antikörper, der in einer Maus aufgewachsen ist, die an Antigen X reagiert und festhält, um herauszufinden, wo diese primären Maus -Antikörper gefunden wurden und an diese Antigen X -Moleküle gebunden sind.Ate, das diesen sekundären Antikörper entweder in enzymatischen oder fluoreszierenden mikroskopischen Assays nachweisbar macht. Bei Assays in der Lokalisierung von Antigenen unter Verwendung eines Elektronenmikroskops werden Goldpartikel häufig als Antikörperkonjugat verwendet, da sie unter Verwendung eines Elektronenstrahls nachgewiesen werden können.
Der Grund für die Verwendung primärer und sekundärer Antikörper, anstatt eine Antikörperkonjugation zu verwenden, in der der primäre Antikörper direkt konjugiert ist, ist die Kostenwirksamkeit. Die Antikörperkonjugation ist in Bezug auf Zeit und Reagenzien teuer. Insbesondere für ungewöhnliche Antigene ist die Antikörperkonjugation an primären Antikörpern nicht die Produktionsstätte wert. Durch die Verwendung der Antikörperkonjugation an sekundären Antikörpern können große Mengen eines konjugierten Antikörpers sofort synthetisiert und in Assays mit einer Reihe von primären Antikörpern verwendet werden, die auf viele verschiedene Antigene zu lokalisieren sind
In einigen Fällen wird jedoch ein primärer Antikörper markiertReduzieren Sie das Rauschen im Erkennungssignal aufgrund der erhöhten nicht spezifischen Antikörperbindung, die sich aus der Verwendung mehrerer Antikörper ergibt. Diese teuren, hochempfindlichen Assays fordern zwar diese Methode weiter. Es ist möglich, Kits zu kaufen, die es einem Forscher ermöglichen, Konjugate auf seinen eigenen Antikörper der Wahl zu markieren, die Kosten des Reagenzs zu erhöhen, aber die Protokollschritte zu verringern und möglicherweise das Signal-Rausch-Verhältnis im endgültigen Antikörper-Nachweis-Assay zu erhöhen.