Qu'est-ce qu'un conjugué d'anticorps?
Un conjugué d'anticorps est une molécule de marquage qui peut être utilisée dans les tests de détection d'antigène histologiques ou enzymatiques pour localiser les anticorps liés. Il fonctionne en étant physiquement attaché ou conjugué à l'anticorps qui est utilisé pour marquer un antigène d'intérêt. Un anticorps étiqueté à un conjugué d'anticorps est un outil souvent utilisé dans la recherche pour identifier l'emplacement exact ou la quantité de protéines ou d'antigènes d'intérêt, contre lesquels les anticorps ou les anticorps ont été soulevés.
Les tests histologiques et protéomiques reposent souvent sur des anticorps comme une réaction dans les techniques de recherche par lesquelles des protéines spécifiques peuvent être marquées. En exposant un antigène ou une protéine d'intérêt à un anticorps qui a été soulevé contre elle, les antigènes ou les protéines peuvent être étiquetés. En utilisant un conjugué d'anticorps - c'est-à-dire un anticorps qui a été conjugué à une molécule spécifiquement utilisée ou synthétisée pour être facilement détectée - des anticorps sur leurs antigènes respectifs peuvent ensuite être identifiés et analyserd. Le type de conjugué d'anticorps le plus courant est une molécule fluorescente, permettant d'identifier les antigènes dans les tissus au microscope fluorescent. D'autres conjugués incluent des molécules comme le radis de cheval peroxydase, qui est utilisée en conjugaison avec des anticorps pour un développement ultérieur avec la diaminobenzidine (DAB).
Les anticorps primaires sont souvent soulevés contre des antigènes spécifiques, tandis que les anticorps secondaires seront conjugués pour marquer des molécules et élevée contre l'anticorps primaire. Par exemple, on pourrait être intéressé à identifier un antigène appelé antigène X. On utiliserait alors, par exemple, un anticorps soulevé dans une souris qui réagit et s'en tient à l'antigène X. Pour pouvoir trouver où ces anticorps de souris primaires ont trouvé et lié à ces molécules X antigènes, un anticorps secondaire serait ensuite utilisé - par exemple, uneAte qui rend cet anticorps secondaire détectable dans des tests microscopiques enzymatiques ou fluorescents. Pour les tests dans la localisation des antigènes à l'aide d'un microscope électronique, les particules d'or sont souvent utilisées comme conjugué d'anticorps car ils peuvent être détectés à l'aide d'un faisceau d'électrons.
La raison de l'utilisation d'anticorps primaires et secondaires, au lieu d'utiliser une conjugaison d'anticorps dans laquelle l'anticorps primaire est directement conjugué, est la rentabilité. La conjugaison des anticorps coûte cher en termes de temps et de réactifs. Surtout pour les antigènes inhabituels, la conjugaison des anticorps sur les anticorps primaires ne vaut pas le coût de la production. Au contraire, en utilisant la conjugaison des anticorps sur des anticorps secondaires, de grandes quantités d'un anticorps conjugué peuvent être synthétisées en même temps et utilisées dans des tests avec une gamme d'anticorps primaires adaptés pour localiser de nombreux antigènes différents, rendant le processus de production valable et rentable.
Dans certains cas, cependant, un anticorps primaire sera tagué àRéduisez le bruit dans le signal de détection en raison de la liaison accrue des anticorps non spécifiques qui résulte de l'utilisation de plusieurs anticorps. Bien que ces tests coûteux et très sensibles appellent toujours cette méthode. Il est possible d'acheter des kits qui permettent à un chercheur d'étiqueter les conjugués à son propre anticorps de choix, augmentant le coût du réactif, mais réduisant les étapes du protocole et éventuellement augmenter le rapport signal / bruit dans le test de détection d'anticorps final.