抗体コンジュゲートとは何ですか?
抗体コンジュゲートは、結合抗体を局在化するための組織学的または酵素的抗原検出アッセイで使用できるタグ付け分子です。 目的の抗原にタグを付けるために使用される抗体に物理的に付着または結合することにより機能します。 抗体コンジュゲートにタグ付けされた抗体は、研究でよく使用されるツールであり、抗体または抗体が生成された対象のタンパク質または抗原の正確な位置または量を特定します。
組織学的およびプロテオミクスアッセイは、特定のタンパク質を標識できる研究技術の試薬として抗体に依存することがよくあります。 目的の抗原またはタンパク質を、それに対して生じた抗体にさらすことにより、抗原またはタンパク質にタグを付けることができます。 抗体コンジュゲート、つまり、簡単に検出できるように特別に使用または合成された分子にコンジュゲートされた抗体を使用することにより、それぞれの抗原上の抗体を同定およびアッセイできます。 最も一般的なタイプの抗体コンジュゲートは蛍光分子であり、蛍光顕微鏡下で組織内の抗原を特定できます。 他の複合体には、ホースラディッシュペルオキシダーゼなどの分子が含まれます。これは、ジアミノベンジジン(DAB)を使用した後の開発のために抗体との複合に使用されます。
多くの場合、一次抗体は特定の抗原に対して生成されますが、二次抗体はタグ分子に結合され、一次抗体に対して生成されます。 一例として、抗原Xと呼ばれる抗原を特定することに興味があるかもしれません。次に、例えば、抗原Xに反応して付着するマウスで産生された抗体を使用します。これらの一次マウス抗体が見つかった場所を見つけることができるようにこれらの抗原X分子に結合した二次抗体(たとえば、ヤギで育てたもの)を使用し、酵素または蛍光顕微鏡アッセイでこの二次抗体を検出可能にするコンジュゲートでタグ付けします。 電子顕微鏡を使用した抗原の局在化のアッセイでは、金粒子は電子ビームを使用して検出できるため、抗体コンジュゲートとしてよく使用されます。
一次抗体が直接結合する抗体結合を使用する代わりに、一次および二次抗体を使用する理由は、費用対効果です。 抗体のコンジュゲーションは、時間と試薬の点で高価です。 特に珍しい抗原については、一次抗体上の抗体コンジュゲーションは生産の費用に見合う価値はありません。 むしろ、二次抗体で抗体コンジュゲーションを使用することにより、大量のコンジュゲート抗体を一度に合成し、多くの異なる抗原を局在化するように調整された一次抗体の範囲でアッセイで使用でき、生産プロセスを価値があり費用対効果の高いものにします。
ただし、場合によっては、複数の抗体を使用することで生じる非特異的抗体結合の増加による検出信号のノイズを減らすために、一次抗体にタグが付けられます。 この高価で高感度のアッセイでは、依然としてこの方法が必要です。 研究者が自分の選択した抗体にコンジュゲートをタグ付けできるキットを購入することは可能ですが、試薬のコストは増加しますが、プロトコルのステップを削減し、最終的な抗体検出アッセイのS / N比を増加させる可能性があります。