細菌性エンドトキシン検査はどのように機能しますか？

細菌のエンドトキシンテストでは、通常、可能性のある汚染物質を含む溶液と混合すると反応を引き起こし、エンドトキシンの存在を示す試薬の使用を伴います。 発色性試験、ゲル凝固試験、比濁試験は、科学者が一般的に細菌性エンドトキシン試験に使用する方法です。 技術者は、エンドトキシンの汚染をチェックする際に、さまざまな物質やオブジェクトに対してこれらの評価方法を使用します。 水、医薬品の製造に使用される原料、機器、および包装はすべて、エンドトキシンの基準を満たしている必要があります。

細菌、真菌、およびウイルスはすべて、LPSとも呼ばれるリポ多糖からなる保護外膜を持っています。 これらの鎖の脂質部分にはエンドトキシンが含まれています。 これらの物質は通常、膜内にとどまりますが、細胞分裂の過程および細胞の破壊または溶解の間に放出されます。 ヒトでは、これらの物質は発熱、異常な凝固、敗血症性ショックなどの症状を引き起こしますが、細胞内の外毒素とは異なり、内毒素はトキソイドに変換されません。 一般的に、微生物学者は、 大腸菌を含むさまざまなグラム陰性細菌に関連する内毒素の存在を確認します。

ゲル凝血試験、またはカブトガニのアメーボ細胞溶解物（LAL）アッセイでは、カブトガニのアメーバ細胞に由来する、カブトガニポリフェムスとも呼ばれる膜破壊化学物質を使用します。 ライセートが問題の物体または物質にさらされたときに凝固またはゲル化が発生した場合、技術者は内毒素の肯定的な兆候を観察します。 微生物学者は通常、決定的な結果を得るために、この方法を発色試験および比濁試験と組み合わせて細菌内毒素試験に使用します。

発色性細菌内毒素検査では、特別に処理されたLALを使用します。 このライセートがエンドトキシンと接触すると、反応により特定の色が生成されます。 最終的なテストプロセスには、ソリューションの濁度または曇りの測定が含まれます。 技術者は、ゲル凝固試験で形成された溶液を分光光度計にさらし、分光光度計は光線を放射します。 ビームが溶液を通過する際のビームの光強度の損失を測定することにより、微生物学者はエンドトキシンが存在するかどうかを判断できます。

ラボの従業員は通常、正確な結果を確保するために、これら3つの細菌性エンドトキシンテストを2、3回完了します。 ゲルテストは、検出下限がミリリットルあたり0.03エーリッヒ単位（EU / ml）であるため、排他的には使用されません。 発色試験および比濁試験により、0.005 EU / mlの範囲のエンドトキシンが検出されます。 安全パラメーターは、試験対象の物質によって大きく異なります。 注射または灌漑目的に使用される滅菌水は、0.25 EU / ml以下しか含むことができませんが、吸入目的の滅菌水には、最大0.5 EU / mlが含まれます。