Hva er en ELISA-analyse?
En ELISA-analyse er en testprosess som oppdager stoffer for å identifisere visse sykdommer, allergier og ulovlige medikamenter i kroppen. Det er også kjent å bli brukt til å påvise humant immunsviktvirus (HIV). Noen av stoffene den kan oppdage er antistoffer, hormoner og proteiner. Hovedprinsippet bak ELISA-analysen er at en kjemisk reaksjon mellom pasientens væskeprøve og en spesifikk laboratorieprøve indikerer tilstedeværelsen av et bestemt stoff assosiert med en spesifikk sykdom eller medisinsk tilstand. ELISA, som et akronym, står for "enzymbundet immunosorbentanalyse."
Oppfinnelsen og utviklingen av ELISA-analysen ble til fordi det var behov for en tryggere testmetode enn radioimmuno-analysen, som bruker radioaktivitet for å produsere en kjemisk reaksjon. På 1960-tallet ble to separate forskere, ledet av Stratis Avrameas og GB Pierce, vellykket med å samarbeide visse antistoffer med visse enzymer og produsere en kjemisk reaksjon fra kombinasjonen. Med denne kunnskapen tilgjengelig, oppfant to forskere fra Stockholms universitet, Peter Perlmann og Eva Engvall, ELISA-metoden, og publiserte sine eksperimenter og systemet bak analysen i 1971. Siden den gang har ELISA-analysen blitt brukt over hele verden, selv om radioimmunoassayet er fremdeles tilgjengelig på grunn av lavere kostnader.
Det er to vanlige typer ELISA-analyse: den direkte og den indirekte metoden, hvor sistnevnte er mer vanlig. Det første trinnet ville være å trekke ut en prøve fra pasienten, vanligvis blod eller urin, som begge kan gjennomgå en separasjonsprosess for å trekke ut det klare serum som inneholder antistoffene. Et ELISA-sett inneholder ofte en plate som inneholder 96 mini-beholdere kalt "brønner", som vil bli belagt med et antigen som muligens kan ha en reaksjon på et nåværende antistoff. Et antigen anses ofte som et fremmed stoff som kroppen angriper ved å produsere spesifikke antistoffer, så hvis en pasient har skaffet seg et antigen fra en viss sykdom, skal serumet hans inneholde antistoffer som tilsvarer det nevnte antigenet.
Pasientens serum blir deretter helt i brønnene og deretter inkubert for å la antistoffene feste seg til proteinbelegget. Etter inkubasjonsperioden skylles brønnene for å fjerne resten av serumet og andre antistoffer som ikke har bundet til belegget. Et annet sett antistoffer ekstrahert fra dyr, vanligvis rotter, vil helles i brønnene for å påvise de humane antistoffene, og en annen inkubasjonsperiode finner sted og dyreantistoffene blir vasket av igjen. Et enzymunderlag vil deretter bli tilsatt slik at reaksjonen kan sees synlig i farger. Vanligvis vil en sterk fargeskygge indikere et positivt resultat, noe som betyr at pasienten har sykdommen eller andre medisinske tilstander testet for.