Che cos'è un test ELISA?
Un saggio ELISA è un processo di test che rileva le sostanze al fine di identificare determinate malattie, allergie e droghe illegali nel corpo. È anche noto per essere utilizzato per rilevare il virus dell'immunodeficienza umana (HIV). Alcune delle sostanze che può rilevare sono anticorpi, ormoni e proteine. Il principio principale alla base del test ELISA è che una reazione chimica tra un campione liquido di un paziente e un campione di laboratorio specifico indica la presenza di una determinata sostanza associata a una malattia o condizione medica specifica. ELISA, come acronimo, sta per "test immunosorbente enzimatico".
L'invenzione e lo sviluppo del saggio ELISA sono avvenuti perché era necessario un metodo di prova più sicuro diverso dal saggio radioimmunologico, che utilizza la radioattività per produrre una reazione chimica. Negli anni '60, due gruppi distinti di scienziati guidati da Stratis Avrameas e GB Pierce hanno avuto successo nel associare alcuni anticorpi con determinati enzimi e produrre una reazione chimica dalla combinazione. Con questa conoscenza a portata di mano, due scienziati dell'Università di Stoccolma, Peter Perlmann ed Eva Engvall, inventarono il metodo ELISA, pubblicando i loro esperimenti e il sistema alla base del saggio nel 1971. Da allora, il saggio ELISA è stato utilizzato in tutto il mondo, sebbene il saggio radioimmunologico sia ancora disponibile a causa del suo costo minore.
Esistono due tipi comuni di test ELISA: il metodo diretto e il metodo indiretto, quest'ultimo utilizzato più comunemente. Il primo passo sarebbe quello di estrarre un campione dal paziente, solitamente sangue o urina, entrambi i quali possono essere sottoposti a un processo di separazione per estrarre il siero trasparente contenente gli anticorpi. Un kit ELISA contiene spesso una piastra che contiene 96 mini-contenitori chiamati "pozzetti", che saranno rivestiti con un antigene che può eventualmente avere una reazione a un anticorpo presente. Un antigene viene spesso considerato una sostanza estranea che il corpo attacca producendo anticorpi specifici, quindi se un paziente ha acquisito un antigene da una determinata malattia, il suo siero dovrebbe contenere anticorpi corrispondenti a detto antigene.
Il siero del paziente verrà quindi versato nei pozzetti e quindi incubato per far aderire gli anticorpi al rivestimento proteico. Dopo il periodo di incubazione, i pozzetti vengono risciacquati per rimuovere il resto del siero e altri anticorpi che non si sono legati al rivestimento. Un'altra serie di anticorpi estratti da animali, di solito ratti, verrà versata nei pozzetti per rilevare gli anticorpi umani, e avrà luogo un altro periodo di incubazione e gli anticorpi degli animali verranno nuovamente lavati. Verrà quindi aggiunto un substrato enzimatico in modo che la reazione possa essere visibilmente osservata a colori. In genere, una forte tonalità di colore indica un risultato positivo, il che significa che il paziente ha la malattia o altre condizioni mediche testate per.