O que é um ensaio ELISA?
Um ensaio ELISA é um processo de teste que detecta substâncias para identificar certas doenças, alergias e drogas ilegais no organismo. Também é conhecido por ser usado para detectar o vírus da imunodeficiência humana (HIV). Algumas das substâncias que ele pode detectar são anticorpos, hormônios e proteínas. O principal princípio por trás do ensaio ELISA é que uma reação química entre a amostra líquida de um paciente e uma amostra laboratorial específica indica a presença de uma determinada substância associada a uma doença ou condição médica específica. ELISA, como acrônimo, significa "ensaio imunossorvente ligado a enzima".
A invenção e o desenvolvimento do ensaio ELISA surgiram porque havia a necessidade de um método de teste mais seguro que não o radioimunoensaio, que usa radioatividade para produzir uma reação química. Na década de 1960, dois grupos separados de cientistas liderados por Stratis Avrameas e GB Pierce tornaram-se bem-sucedidos na parceria de certos anticorpos com certas enzimas e na produção de uma reação química a partir da combinação. Com esse conhecimento em mãos, dois cientistas da Universidade de Estocolmo, Peter Perlmann e Eva Engvall, inventaram o método ELISA, publicando suas experiências e o sistema por trás do ensaio em 1971. Desde então, o ensaio ELISA tem sido usado em todo o mundo, embora o radioimunoensaio seja ainda disponível devido ao seu menor custo.
Existem dois tipos comuns de ensaio ELISA: o método direto e o indireto, sendo este último mais comumente usado. O primeiro passo seria extrair uma amostra do paciente, geralmente sangue ou urina, os quais podem passar por um processo de separação para extrair o soro transparente que contém os anticorpos. Um kit ELISA geralmente contém uma placa que contém 96 mini-recipientes chamados "poços", que serão revestidos com um antígeno que pode possivelmente ter uma reação a um anticorpo presente. Um antígeno é freqüentemente considerado uma substância estranha que o corpo ataca produzindo anticorpos específicos; portanto, se um paciente adquiriu um antígeno de uma determinada doença, seu soro deve conter anticorpos que correspondam ao referido antígeno.
O soro do paciente será então derramado nos poços e depois incubado para permitir a adesão dos anticorpos ao revestimento da proteína. Após o período de incubação, os poços são lavados para remover o restante do soro e outros anticorpos que não se ligaram ao revestimento. Outro conjunto de anticorpos extraídos de animais, geralmente ratos, será derramado nos poços para detectar os anticorpos humanos, e outro período de incubação ocorrerá e os anticorpos dos animais serão lavados novamente. Um substrato enzimático será então adicionado para que a reação possa ser vista visivelmente em cores. Normalmente, um tom de cor forte indica um resultado positivo, o que significa que o paciente tem a doença ou outras condições médicas testadas.