Was ist ein ELISA-Assay?
Ein ELISA-Assay ist ein Testverfahren, das Substanzen nachweist, um bestimmte Krankheiten, Allergien und illegale Drogen im Körper zu identifizieren. Es ist auch bekannt, dass es zum Nachweis des humanen Immundefizienzvirus (HIV) verwendet wird. Einige der Substanzen, die es nachweisen kann, sind Antikörper, Hormone und Proteine. Das Hauptprinzip des ELISA-Assays besteht darin, dass eine chemische Reaktion zwischen der Flüssigkeitsprobe eines Patienten und einer bestimmten Laborprobe auf das Vorhandensein einer bestimmten Substanz hinweist, die mit einer bestimmten Krankheit oder einem bestimmten medizinischen Zustand assoziiert ist. ELISA steht als Akronym für "Enzyme Linked Immunosorbent Assay".
Die Erfindung und Entwicklung des ELISA-Assays erfolgte, weil ein anderes sichereres Testverfahren als der Radioimmunoassay erforderlich war, bei dem die Radioaktivität zur Erzeugung einer chemischen Reaktion verwendet wird. In den 1960er Jahren gelang es zwei getrennten Gruppen von Wissenschaftlern, die von Stratis Avrameas und GB Pierce angeführt wurden, bestimmte Antikörper mit bestimmten Enzymen zusammenzubringen und eine chemische Reaktion aus der Kombination hervorzurufen. Mit diesem Wissen haben zwei Wissenschaftler der Universität Stockholm, Peter Perlmann und Eva Engvall, die ELISA-Methode erfunden und ihre Experimente und das System hinter dem Assay 1971 veröffentlicht. Seitdem wird der ELISA-Assay weltweit verwendet, obwohl es sich um den Radioimmunoassay handelt noch verfügbar aufgrund seiner geringeren Kosten.
Es gibt zwei übliche Arten von ELISA-Tests: die direkte und die indirekte Methode, wobei letztere häufiger verwendet wird. Der erste Schritt würde darin bestehen, dem Patienten eine Probe zu entnehmen, üblicherweise Blut oder Urin, die beide einem Trennungsprozess unterzogen werden können, um das klare Serum zu extrahieren, das die Antikörper enthält. Ein ELISA-Kit enthält häufig eine Platte mit 96 Minibehältern, die als "Wells" bezeichnet werden und mit einem Antigen beschichtet sind, das möglicherweise auf einen vorhandenen Antikörper reagiert. Ein Antigen wird oft als eine Fremdsubstanz betrachtet, die der Körper angreift, indem er spezifische Antikörper produziert. Wenn ein Patient ein Antigen aus einer bestimmten Krankheit erworben hat, sollte sein Serum Antikörper enthalten, die dem genannten Antigen entsprechen.
Das Patientenserum wird dann in die Vertiefungen gegossen und dann inkubiert, damit die Antikörper an der Proteinbeschichtung haften bleiben. Nach der Inkubationszeit werden die Vertiefungen abgespült, um den Rest des Serums und andere Antikörper zu entfernen, die nicht an die Beschichtung gebunden haben. Ein weiterer Satz von Antikörpern, die aus Tieren, üblicherweise Ratten, extrahiert wurden, wird in die Vertiefungen gegossen, um die menschlichen Antikörper nachzuweisen, und eine weitere Inkubationszeit findet statt, und die tierischen Antikörper werden erneut abgewaschen. Anschließend wird ein Enzymsubstrat hinzugefügt, damit die Reaktion in Farben sichtbar ist. In der Regel weist ein starker Farbton auf ein positives Ergebnis hin, was bedeutet, dass der Patient die Krankheit oder andere Erkrankungen hat, auf die getestet wurde.