Hvad er en ELISA-analyse?
Et ELISA-assay er en testproces, der detekterer stoffer for at identificere visse sygdomme, allergier og ulovlige stoffer i kroppen. Det er også kendt at blive brugt til at detektere human immundefektvirus (HIV). Nogle af de stoffer, den kan påvise, er antistoffer, hormoner og proteiner. Hovedprincippet bag ELISA-assayet er, at en kemisk reaktion mellem en patients flydende prøve og en specifik laboratorieprøve indikerer tilstedeværelsen af et bestemt stof, der er forbundet med en specifik sygdom eller medicinsk tilstand. ELISA står som en forkortelse for "enzymbundet immunosorbentassay."
Opfindelsen og udviklingen af ELISA-assayet skete, fordi der var et behov for en mere sikker testmetode end radioimmunoassayet, der bruger radioaktivitet til at producere en kemisk reaktion. I 1960'erne lykkedes det to separate forskergrupper, der var spydet af Stratis Avrameas og GB Pierce, med succes at samarbejde med visse antistoffer med visse enzymer og frembringe en kemisk reaktion fra kombinationen. Med denne viden til rådighed opfandt to forskere fra Stockholms Universitet, Peter Perlmann og Eva Engvall, ELISA-metoden og offentliggjorde deres eksperimenter og systemet bag assayet i 1971. Siden da er ELISA-assayet blevet brugt over hele verden, selvom radioimmunoassayet er stadig tilgængelig på grund af dets lavere omkostninger.
Der er to almindelige typer ELISA-assay: den direkte og den indirekte metode, hvor sidstnævnte er mere almindeligt anvendt. Det første trin ville være at ekstrahere en prøve fra patienten, sædvanligvis blod eller urin, som begge kan gennemgå en separationsproces for at ekstrahere det klare serum, der indeholder antistofferne. Et ELISA-sæt indeholder ofte en plade, der indeholder 96 mini-containere kaldet "brønde", som vil blive coatet med et antigen, der muligvis kan have en reaktion på et nuværende antistof. Et antigen betragtes ofte som et fremmed stof, som kroppen angriber ved at producere specifikke antistoffer, så hvis en patient har erhvervet et antigen fra en bestemt sygdom, skal hans serum indeholde antistoffer, der svarer til det nævnte antigen.
Patientens serum hældes derefter i brøndene og inkuberes derefter for at lade antistofferne klæbe fast til proteinbelægningen. Efter inkubationsperioden skylles brøndene for at fjerne resten af serumet og andre antistoffer, der ikke er bundet til belægningen. Et andet sæt antistoffer, der er ekstraheret fra dyr, sædvanligvis rotter, hældes i brøndene for at påvise de humane antistoffer, og en anden inkubationsperiode finder sted, og dyreantistofferne vaskes af igen. Et enzymsubstrat tilsættes derefter, så reaktionen kan ses synligt i farver. Typisk vil en stærk farve nuance indikere et positivt resultat, hvilket betyder, at patienten har sygdommen eller andre medicinske tilstande, der er testet for.