Co je test ELISA?
Test ELISA je testovací proces, který detekuje látky za účelem identifikace určitých nemocí, alergií a nelegálních drog v těle. Je také známo, že se používá k detekci viru lidské imunodeficience (HIV). Některé z látek, které dokáže detekovat, jsou protilátky, hormony a proteiny. Hlavním principem testu ELISA je, že chemická reakce mezi kapalným vzorkem pacienta a konkrétním laboratorním vzorkem naznačuje přítomnost určité látky spojené se specifickým onemocněním nebo zdravotním stavem. ELISA, jako zkratka, znamená „enzymově vázaný imunosorbentový test“.
Vynález a vývoj testu ELISA vznikl, protože zde byla potřeba bezpečnější testovací metoda jiná než radioimunoanalýza, která používá radioaktivitu k vyvolání chemické reakce. V 60. letech se dvě oddělené skupiny vědců vedených Stratis Avrameasem a GB Pierceem úspěšně spojily určité protilátky s určitými enzymy a vyvolaly chemickou reakci z kombinace. Díky těmto znalostem vynalezli dva vědci ze Stockholmské univerzity Peter Perlmann a Eva Engvall v roce 1971 metodu ELISA, která publikovala své experimenty a systém za testem. Od té doby se test ELISA používá celosvětově, ačkoli radioimunoanalýza díky nižším nákladům je stále k dispozici.
Existují dva běžné typy testu ELISA: přímá a nepřímá metoda, která se běžně používá. Prvním krokem by bylo extrahování vzorku od pacienta, obvykle krve nebo moči, přičemž oba mohou být podrobeny separačnímu procesu, aby se extrahovalo čiré sérum obsahující protilátky. Souprava ELISA často obsahuje destičku, která pojme 96 mini-nádob zvaných „jamky“, které budou potaženy antigenem, který může mít reakci na přítomnou protilátku. Antigen je často považován za cizí látku, kterou tělo napadá vytvářením specifických protilátek, takže pokud pacient získal antigen z určité nemoci, jeho sérum by mělo obsahovat protilátky, které odpovídají uvedenému antigenu.
Sérum pacienta se poté nalije do jamek a poté se inkubuje, aby se protilátky mohly přilnout k proteinovému povlaku. Po inkubační době se jamky opláchnou, aby se odstranil zbytek séra a dalších protilátek, které se nevázaly na povlak. Do jamek se nalije další sada protilátek extrahovaných ze zvířat, obvykle potkanů, aby se detekovaly lidské protilátky, a dojde k další inkubační periodě a zvířecí protilátky se znovu omyjí. Potom bude přidán enzymový substrát, takže reakce bude viditelně viditelná v barvách. Silný odstín barvy obvykle znamená pozitivní výsledek, což znamená, že pacient má nemoc nebo jiné zdravotní stavy testovány.