O que é um microscópio de fluorescência?
Um microscópio de fluorescência é um microscópio usado para examinar amostras com propriedades luminescentes ou amostras que foram preparadas com substâncias que criam propriedades luminescentes. Nesse tipo de microscopia, o próprio espécime é a fonte de luz. Uma grande quantidade de informações pode ser coletada com o uso de um microscópio de fluorescência, e esses microscópios também podem ser usados para criar imagens impressionantes nas quais estruturas detalhadas são claramente visíveis.
Esses microscópios aproveitam as propriedades de certos compostos químicos. Quando excitados pela luz do comprimento de onda adequado, luz ultravioleta clássica, esses produtos químicos acendem. Se a luminescência é breve, é conhecida como fluorescência, enquanto um período mais prolongado de luminescência após a excitação é chamado de fosforescência. Nos dois casos, a cor da luminescência variará, dependendo dos produtos químicos envolvidos, assim como a duração precisa do período de luminescência.
Em um microscópio de fluorescência, a luz de um comprimento de onda específico é passada através de um condensador de microscópio especializado que focaliza a luz em um feixe muito estreito. Quando a luz atinge a amostra, os compostos luminescentes ficam excitados e começam a emitir luz. Com o uso de um espelho dicróico que filtra o feixe de luz usado para excitar a amostra, um pesquisador pode ver claramente a luminescência e fazer anotações sobre suas propriedades, ou tirar uma fotografia da amostra no estágio do microscópio para referência futura.
Como a luz usada em um microscópio de fluorescência costuma ser potencialmente perigosa para os olhos, geralmente é necessário usar um filtro polarizador na ocular, para que os olhos do usuário não sejam danificados pelo microscópio. Os filtros polarizadores também podem ser usados para correção de cores ou para aumentar o contraste, de modo que a luminescência seja mais claramente visível. Como em outros microscópios, a nitidez da imagem pode ser ajustada focando os componentes do microscópio, e o nível de ampliação também pode ser aumentado ou diminuído conforme necessário.
Em alguns casos, uma amostra pode ser naturalmente luminescente, como no caso de alguns minerais que fluorescem ou fosforescem sob a luz de um comprimento de onda específico. As amostras também podem ser marcadas com moléculas conhecidas como fluoróforos. Essas moléculas podem atingir estruturas específicas dentro da amostra, criando uma imagem fluorescente de estruturas dignas de nota quando a amostra é excitada pela luz no microscópio.
Um microscópio de fluorescência pode ser uma compra cara, especialmente no caso de microscópios de alta qualidade. Como regra geral, esse tipo de microscopia está disponível apenas para laboratórios muito bem equipados.