ビオチン抗体とは?
最初に考えるかもしれないこととは反対に、ビオチン抗体はビオチンに対して生じる物質ではありません。 むしろ、ビオチン抗体はビオチンに結合した抗体です。 ビオチンはリガンド(アビジン)に強く結合します。アビジンは、フルオロフォアなどの光検出可能な分子に結合できます。 ビオチンとアビジンは、既知の最も強力な生物学的に関連する共有結合の1つを形成し、科学研究においてビオチンおよびアビジン結合リガンド/受容体ユニットを特に有用にします。
ビオチンはビタミンB7であるB複合ビタミンです。 複数のビオチン分子を単一のモノクローナルまたはポリクローナル抗体に結合させることができるのは非常に小さな分子です。 ビオチンも水溶性であるという事実は、それが不溶性である場合よりも緩衝液システムでのより大きな汎用性を可能にします。 特異性を高めるために、ポリクローナル抗体のコンジュゲーションよりもビオチンへのモノクローナル抗体のコンジュゲーションが推奨されることがよくあります。 ビオチン分子は、目的の抗体と直接結合することも、分子テールを介して結合して移動の自由度を高めることもできます。
ビオチンリガンドアビジンは卵アルブミンに含まれています。 安価で簡単に分離できます。 複数のアビジン分子が各ビオチン受容体に結合し、単一の抗体検出シグナルを増幅します。 ビオチン抗体が目的の抗原に付着すると、実験者は複合体をフルオロフォアに結合したアビジンにさらし、複合体を検出可能にすることができます。 蛍光イメージングにより、ビオチン抗体とアビジン結合リガンドを光学顕微鏡で検出でき、目的の抗原をin situで研究できます。
ビオチン抗体と蛍光標識アビジン分子の作成と使用は抗原検出の一般的な解決策ですが、ビオチン/アビジン複合体を使用する代替手段も存在します。 神経毒のようなリガンドへのビオチンの結合は、問題の神経毒の影響を受ける神経受容体の配置を検出するのに有利です。 また、ビオチンをメッセンジャーリボ核酸(mRNA)などのヌクレオチド配列に結合させて、これらのヌクレオチド配列がタンパク質に翻訳されている場所を見つけたり、細胞のmRNA調節を検出することもできます。
ビオチン化抗体の生産は多くの実験者の能力の範囲内ですが、ビオチン化ポリクローナルまたはモノクローナル抗体を購入することは可能です。 プロトコルは、抗体のビオチン化方法を提案するオンラインで見つけることができますが、最も簡単に続くプロトコルは、分子スペーサーを挿入する方法を提案するのではなく、ビオチンを抗体に直接リンクします。 ビオチンとその関連抗体との間の分子スペーサーにより、より多くの分子を結合部位にさらすためのより大きな間隔が可能になり、これらのビオチン抗体は通常作られるのではなく購入されます。