Was ist ein Biotinantikörper?

Im Gegensatz zu dem, was man zum ersten Mal denken könnte, ist ein Biotin -Antikörper keine Substanz, die gegen Biotin angehoben wird. Ein Biotinantikörper ist vielmehr ein Antikörper, der bis Biotin konjugiert wurde. Biotin bindet stark an einen Liganden-Avidin-, der wiederum an lichtdetektierbare Moleküle wie Fluorophore konjugiert werden kann. Biotin und Avidin bilden eine der stärksten biologisch relevanten kovalenten Bindungen, die Biotin- und Avidin-konjugierte Liganden-/Rezeptoreinheiten besonders nützlich in wissenschaftlichen Studien machen.

Biotin ist ein B-Komplex-Vitamin-Vitamin B7. Es ist ein so kleines Molekül, dass mehrere Biotinmoleküle an einen einzelnen monoklonalen oder polyklonalen Antikörper konjugiert werden können. Die Tatsache, dass Biotin auch wasserlöslich ist, ermöglicht eine größere Vielseitigkeit in Puffersystemen als wenn es unlöslich wäre. Für eine größere Spezifität wird häufig eine monoklonale Antikörperkonjugation gegen Biotin für die polyklonale Antikörperkonjugation empfohlen. Das Biotinmolekül kann direkt bo seinNdee mit dem Antikörper des Interesses oder kann durch einen molekularen Schwanz mit mehr Bewegungsfreiheit verbunden werden. Es kann billig gemacht und leicht isoliert werden. Mehrere Avidinmoleküle binden an jeden Biotinrezeptor, wodurch ein einzelnes Antikörper -Nachweissignal verstärkt. Wenn ein Biotin -Antikörper an ein interessierendes Antigen haftet, kann ein Experimentator den an Fluorophoren konjugierten Komplex aussetzen, was den Komplex nachweisbar macht. Durch fluoreszierende Bildgebung können der Biotin-Antikörper und der Avidin-konjugierte Ligand mit Lichtmikroskopie nachgewiesen werden, und Antigene von Interesse können in situ .

untersucht werden

Obwohl die Erstellung und Verwendung eines Biotinantikörpers und eines fluoreszenz markierten Avidinmoleküls eine häufige Lösung für den Antigen -Nachweis ist, existieren Alternativen, die immer noch den Biotin/Avidin -Komplex verwenden. Bindungsbiotin an aLigand wie ein Neurotoxin kann bei der Nachweis der Platzierung von neuronalen Rezeptoren, die vom fraglichen Neurotoxin betroffen sind, vorteilhaft sein. Es ist auch möglich, Biotin an eine Nucleotidsequenz wie Messenger Ribonukleinsäure (mRNA) zu konjugieren, um festzustellen

Es ist möglich, biotinylierte polyklonale oder monoklonale Antikörper zu kaufen, obwohl die biotinylierte Antikörperproduktion vieler Experimentatoren in der Lage ist. Protokolle sind online zu finden, was auf Antikörperbiotinylierungsmethoden hinweist, obwohl die meisten Protokolle Biotin direkt mit einem Antikörper verknüpfen, anstatt vorzuschlagen, wie ein molekularer Abstandshalter interkaliert. Molekulare Abstandshalter zwischen Biotin und seinem assoziierten Antikörper ermöglichen einen größeren Abstand, um mehr Molekülen an Bindungsstellen zu sorgen, und diese Biotin -Antikörper werden normalerweise eher gekauft als hergestellt.