Quais são os diferentes tipos de kits de isolamento de RNA?
A maioria dos kits de isolamento de ácido ribonucleico (RNA) pode isolar o RNA de alta qualidade de uma ampla variedade de tecidos e tipos de organismos, incluindo plantas, animais e vírus. O RNA mitocondrial e ribossômico - mRNA e rRNA, respectivamente - pode exigir kits especializados de isolamento de RNA específicos para pequenas cadeias de RNA. Outros fatores que podem diferir entre os vários kits de isolamento são a quantidade de amostras que cada kit pode processar e o tempo necessário para processar completamente uma amostra.
Os tipos mais comuns de kits de isolamento de RNA podem ser usados para uma grande variedade de aplicações, independentemente da origem do RNA. Células e tecidos de mamíferos estão entre as fontes mais predominantes usadas para isolamento e purificação de RNA. Células vegetais e vírus também são usados em experimentos de biologia molecular que requerem o uso de um kit de isolamento de RNA.
Depois que a amostra de tecido ou sangue é coletada, ela deve ser preparada para o isolamento do RNA durante um processo crítico conhecido como degradação, separação ou interrupção celular. Se o material celular não for concluído interrompido, o processo de isolamento do RNA produzirá menos RNA. Os melhores kits de isolamento de RNA incluem materiais e suprimentos para degradação celular antes do isolamento e purificação do RNA após o isolamento.
Em casos especiais em que um experimento requer mRNA ou rRNA, estão disponíveis kits especializados de isolamento de RNA para cadeias de RNA particularmente pequenas. Os materiais e suprimentos incluídos nesse kit podem ser diferentes em termos de quantidade e tamanho. Esses kits de isolamento de RNA são menos comuns que os kits de RNA multiuso, e pode haver uma diferença de custo substancial.
Muitos kits comuns de isolamento de RNA são projetados para uso com todos os tipos de tecidos e células e podem concluir uma reação em aproximadamente 20 minutos. O tempo necessário para a degradação celular completa pode variar dependendo de onde no organismo as células foram coletadas. Além do passo da degradação celular, o processo de isolamento do RNA e a subsequente purificação são relativamente padrão em termos de procedimento e tempo.
Outra característica que pode ser específica para certos kits é a quantidade de amostra necessária para processar a reação. Enquanto alguns kits de isolamento podem exigir um volume de amostra relativamente grande, outros podem funcionar bem com um volume menor. Essa diferença pode ser uma vantagem se o volume da amostra for um fator limitante.
Vários fabricantes de kits de isolamento de RNA têm gráficos de comparação disponíveis na Internet. Esses gráficos podem ser usados para ver as diferenças entre os vários kits que eles produzem. As diferenças podem incluir tipos de aplicação especializados, produtos químicos e volumes de amostra necessários.