Was ist DNA-Fällung?
Die Ausfällung von Desoxyribonukleinsäure (DNA) ist ein Schlüsselschritt bei der Isolierung und Reinigung von genetischem Material in der Wissenschaft. Im Allgemeinen enthält eine Probe von biologischem Gewebe DNA oder RNA zusammen mit dem Rest des Organismus. Um die DNA zu testen, muss ein Wissenschaftler die DNA von allen anderen Substanzen trennen. DNA-Fällung bezieht sich speziell auf einen Schritt, der die Abtrennung von gelöster DNA aus der Flüssigkeit umfasst, in der sie gelöst ist. Übliche Methoden der DNA-Fällung umfassen die Zugabe von Ethanol, Ispropanol oder Glykogen zur Flüssigkeit, wodurch die DNA in Klumpen erstarrt und in die Flüssigkeit fällt Boden der flüssigen Probe.
Erste Schritte bei der Reinigung von DNA aus einer Probe können so einfach sein, dass Blätter in einer Schüssel zerkleinert werden, um einen Teil der Struktur aufzubrechen. Dann kann die Maische mit Chemikalien oder Enzymen zersetzt werden, die die DNA intakt lassen. Im Allgemeinen verwenden Genetiker eine Zentrifuge, um verschiedene Bestandteile einer Probe aufzuteilen. Dies ist eine Maschine, die eine Probe so dreht, dass die schwerste Komponente nach unten sinkt und die leichteste nach oben steigt.
Durch das Entfernen verschiedener unerwünschter Komponenten bleibt dem Genetiker normalerweise eine klare Flüssigkeit zurück, die das genetische Material enthält. Er oder sie muss dann die in dieser Flüssigkeit gelöste DNA herausnehmen und die Flüssigkeit und die anderen Substanzen in der Flüssigkeit verwerfen. DNA-Fällung ist die Art und Weise, wie dies erreicht wird. In den meisten Fällen muss der Wissenschaftler der Flüssigkeit eine Chemikalie hinzufügen, um eine DNA-Fällung durchzuführen.
Ethanol oder Isopropanol, die beide Formen von Alkohol sind und in die Lösungsmittelgruppe der Chemikalien fallen, sind die häufigsten Chemikalien, die für die DNA-Fällung verwendet werden. Glykogen ist eine andere Substanz, die DNA ausfällen kann, aber es wird weniger häufig verwendet, abgesehen von der Ausfällung geringer Konzentrationen von genetischem Material. Wenn sich diese Chemikalien mit gelöster DNA vermischen, können sie durch ihre Chemie die Art und Weise verändern, wie sich DNA in ihre Umgebung einfügt. Während sich die DNA vorher leicht mit der Flüssigkeit vermischt, hört sie nach der chemischen Zugabe auf, sich mit der Flüssigkeit zu verbinden und bildet stattdessen einen Feststoff.
Dieser Feststoff ist normalerweise weißlich und verklumpt zusammen. Da sich ein Teil des Feststoffs noch in kleinen Partikeln befindet, gibt der Wissenschaftler die Probe normalerweise in eine Zentrifuge, um alle Feststoffe zusammen zu einem Pellet am Boden des Probenröhrchens zu drehen. Dies ist die gereinigte Form der ursprünglich in der Probe vorhandenen DNA, die zum Testen nützlich ist. Im Allgemeinen wird die Flüssigkeit, in der das Pellet suspendiert ist, aus dem Röhrchen entfernt, und das Pellet kann auch getrocknet werden, damit die Chemikalien verdampfen können, um das Pellet so rein wie möglich zu machen.